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目的:通过观察大鼠肢体缺血再灌注损伤(LIRI)时不同时相软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达水平的变化,探讨Bcl-2、Bax蛋白在LIRI模型软骨细胞凋亡中所起的作用及相互关系。方法:将40只SD大鼠随机分为对照组(假手术组)、缺血组、缺血6h再灌注1天、3天、7天、14天、30天及60天组,每组5只,均取左后肢为实验侧。根据陈建的方法建立大鼠肢体缺血再灌注模型。分别于再灌注后相应时间点分批处死动物,取左胫骨平台内侧软骨组织,以4%的多聚甲醛固定24小时,经脱钙、脱水、二甲苯透明及石蜡包埋后,4μm连续切片。采用TUNEL法观察软骨细胞凋亡情况;免疫组化技术检测软骨中Bcl-2及Bax蛋白表达水平的变化。所有数据均以(?)±S表示,采用SPSS13.0进行统计分析,P＜0.05为差异有统计学意义。结果:1.细胞凋亡的变化:对照组未见凋亡细胞:缺血组少见凋亡细胞(3.44±1.17);随再灌时间延长,凋亡细胞数上调,再灌7天达到高峰(24.36±2.24);以后凋亡细胞数有所下降,但再灌60天的凋亡细胞数与对照组及缺血组相比仍有显著差异(P＜0.01)。再灌各组与对照组比较差异有统计学意义。2.Bcl-2蛋白表达的变化:对照组软骨表中层Bcl-2弱阳性表达,灰度值为(156.78±10.42);缺血组阳性表达明显增强,灰度值为(132.74±9.18);再灌3天阳性表达至高峰,灰度值为(93.30±7.55);再灌7天后各组阳性表达逐渐减弱,灰度值分别为(106.02±7.73,117.34±9.15,127.58±10.92,130.14±9.19)。再灌各组与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。3.Bax蛋白表达的变化:对照组软骨表层Bax轻度阳性表达,灰度值为(139.68±7.15);随着再灌注时间延长,其阳性表达不断上调,至再灌7天时达到高峰,灰度值为(82.00±8.58);随后Bax阳性表达又逐渐下调,再灌60天灰度值为(115.72±9.99)。再灌各组与对照组比较差异有显著意义。4.Bcl-2/Bax灰度值比值与凋亡细胞数相关性:结果显示除再灌3天组外,其它各再灌组二者呈正相关(P＜0.05),相关系数为0.876。结论:1.细胞凋亡是肢体缺血再灌注软骨损伤的机制之一。2.Bcl-2、Bax基因可能参与对肢体缺血再灌注软骨细胞凋亡的调控。3.Bcl-2/Bax比值的失衡可能是肢体缺血再灌注损伤时软骨细胞凋亡的机制之一。