益气活血法对氧诱导小鼠视网膜新生血管NOTCH1、DLL4、CREB表达的影响

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:beibeigou
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目的:通过观察益气活血中药对于氧诱导小鼠视网膜新生血管中NOTCH1、DLL4、CREB的表达的影响,探索益气活血中药对于氧诱导小鼠视网膜新生血管的作用机制。方法:取健康新生C57BL/6J小鼠53只,随机分成高氧模型组(OIR组)与正常对照组,高氧模型组40只小鼠于出生后第7天与母鼠共同放置于75%±2%高氧环境中持续5d,5d后于正常空气中饲养;对照组13只小鼠,置于正常空气中饲养。于P17分别取正常对照组和高氧模型组各5只小鼠眼球做病理切片观察小鼠视网膜新生血管突破内界膜的数目;分别取正常对照组和高氧模型组各2只小鼠眼球采用FITC-Dextran荧光素血管灌注视网膜铺片观察小鼠视网膜新生血管生长情况。取造模成功后余下的OIR模型鼠31只,随机分为5组,分别为中药高剂量组(A组)6只、中药中剂量组(B组)6只、中药低剂量组(C组)6只、阳性药物对照组(D组)7只、模型对照组(E组)6只;余下正常空气中饲养的幼鼠6只作为正常对照组(F组),于P17开始给予A、B、C组灌胃中药黄芪、灯盏细辛、葛根提取物,予D组灌胃阿帕替尼,直至P24实验结束时全部处死。取各组小鼠眼球做Western blot、免疫组织化学检测标本视网膜CREB、NOTCH1、DLL4的表达。结果:1.与空白组相比,高氧对照组细胞中CREB蛋白表达升高,差异极其显著(P<0.01);其余组与高氧对照组相比,阳性药物对照组、中药高剂量组细胞中CREB蛋白表达降低,差异极其显著(P<0.01);中药中剂量组细胞中CREB蛋白表达降低,差异显著(P<0.05)。2.与空白组相比,高氧对照组细胞中NOTCH1蛋白含量明显降低,具有显著的统计学意义(P<0.01)。与高氧对照组相比,阳性药物对照组、中药中剂量组、中药低剂量组细胞中NOTCH1蛋白含量无明显差异,不具有显著统计学意义(P>0.05);中药高剂量组细胞中NOTCH1蛋白含量升高,具有统计学意义(P<0.05)。3.与高氧对照组相比,阳性药物对照组、中药高剂量组细胞中DLL4蛋白含量明显升高,具有显著统计学意义(P<0.01);中药中剂量组、中药低剂量组细胞中DLL4蛋白含量无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05)。结论:运用中药黄芪、灯盏细辛、葛根提取物体现的益气活血法可以抑制氧诱导小鼠视网膜病变组织中CREB的表达,增加视网膜病变组织中NOTCH1、DLL4的表达,对视网膜结构和功能的完整具有保护作用。
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