万寿菊花中黄酮类成分提取与ASE-100提取叶黄素的研究

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叶黄素是一种天然的类胡萝卜素,广泛地分布在水果和蔬菜中,特别是在万寿菊花中。万寿菊花中叶黄素含量非常高,其他类胡萝卜色素的含量非常低,是提取叶黄素的理想材料。万寿菊花也是叶黄素在食品工业中应用的最重要的来源。万寿菊花中游离叶黄素非常低,以叶黄素酯的形式存在,不易被人体吸收,而很多功能性食品添加剂对叶黄素的纯度要求很高,所以开发与之相适应的功能性叶黄素食品具有重大意义。早在上世纪80年代中期,西方医学研究人员就发现植物所含天然叶黄素是一种性能优异的抗氧化剂。将一定量叶黄素添加到食品中,可防止人体因器官衰老引起的一系列疾病。大量流行病学证据表明,叶黄素对视觉有保护作用,并具有预防白内障、动脉硬化、增强免疫力等功效,特别在预防癌变发生、延缓癌症发展等方面起着重要作用,是目前国际上功能性食品成分研究中的一个热点。我国对万寿菊中叶黄素的研究开发较少,而且一般用有机溶剂法提取,操作复杂。本文针对这一问题,首次采用ASE-100加速溶剂萃取仪对叶黄素的提取进行了研究,优化ASE-100萃取过程的试验参数,确立了有效提取叶黄素的方法。本文为提取万寿菊黄色素开发新的食品添加剂提供一定的理论依据和实践参考价值。通过叶黄素提取过程中各种实验因素的考察,采用五因素五水平正交试验设计方案,对皂化后的叶黄素用HPLC测定,确定了用ASE-100加速溶剂萃取从万寿菊花中提取叶黄素的最佳试验参数:提取温度80℃、料液比1:20、Static time 10min、Static cycle 3次、Flush volume 70%。本实验中万寿菊中叶黄素油脂的皂化条件为:皂化温度60℃、皂化时间8h、皂化碱浓度40%KOH。本研究以万寿菊花瓣粉末为原料,采用95%乙醇超声提取,有机溶剂萃取后,经葡聚糖(Sephadex LH-20)层析,硅胶柱层析,以乙酸乙酯、甲醇、水梯度洗脱,硅胶柱纯化后,共得到了五种化合物,经TLC、MS、UV等鉴定手段鉴定出四种:槲皮万寿菊素(Ⅰ)、丁香酸(Ⅱ)、槲皮素(Ⅲ)、β-香树脂醇(Ⅳ)。其中化合物(Ⅴ)尚未鉴定,有待于进一步研究。本文创新点:采用ASE-100加速溶剂萃取仪对万寿菊中的油脂进行提取,并且采用正交试验确定了用ASE-100加速溶剂萃取仪提取叶黄素的最佳试验参数。
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