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目的:越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNAs)在肿瘤的发生发展中扮演着重要的角色,lncRNAs很可能成为一类新的肿瘤标记物和治疗靶标。本实验拟探讨lncRNA NEAT1作为结直肠癌标记物对患者临床特征及生存期的预测能力,以及深入研究NEAT1对结直肠癌发生发展的影响和调控机制。方法:在30对结直肠癌患者组织标本中检测NEAT1表达水平,之后,扩大样本量至100例分析NEAT1与临床特征之间的相关性,以及对预后的影响。通过转染NEAT1特异性的siRNAs或pcDNA3.1-NEAT1质粒检测敲低或过表达NEAT1后对结直肠癌细胞增殖和侵袭等功能的影响。观察过表达的NEAT1对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。采用生物学信息技术预测miRNA与NEAT1和下游靶蛋白相互作用的结合位点,构建NEAT1和mRNA 3’UTR的荧光素酶报告基因,明确miRNA结合NEAT1和下游靶蛋白的结构域。过表达miRNA后检测NEAT1和下游靶蛋白mRNA表达水平的变化。通过共转染pcDNA3.1-NEAT1质粒和si-SIRT1小干扰后检测结直肠癌细胞增殖和侵袭能力;以及共转染pcDNA3.1-NEAT1质粒和miRNA mimics检测SIRT1的mRNA和蛋白表达情况;最后在30例结直肠肠癌组织中验证NEAT1,miRNA以及SIRT1三者的相关性。结果:NEAT1在结直肠癌组织表达水平明显升高,并且NEAT1与CEA水平,淋巴转移,远处转移以及TNM分期呈正相关(p<0.05);同时,NEAT1的表达水平与结直肠癌患者预后呈负相关,可以作为独立的预后分子标记物。NEAT1的高表达可以显著促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭能力;裸鼠实验体内过表达NEAT1可以明显促进移植瘤的生长。通过生物学信息技术预测NEAT1与miR-34a,miR-34a与SIRT1 3’UTR有相互特异性结合的碱基序列;在结直肠癌细胞中过表达miR-34a后NEAT1以及SIRT1的表达水平明显下降;而过表达NEAT1后,SIRT1 mRNA表达水平明显升高。转染pcDNA3.1-NEAT1质粒后可促进结直肠癌细胞的增殖和侵袭,但此效应可被si-SIRT1部分抵消。转染pcDNA-3.1-NEAT1质粒后,SIRT1的表达水平升高,但共转染miR-34a mimics后,SIRT1的表达升高水平被削弱。荧光素酶报告实验提示:NEAT1通过与SIRT1竞争性结合miR-34a,从而影响SIRT1的表达水平。临床样本中也证实了miR-34a分别与NEAT1和SIRT1表达成负相关,NEAT1与SIRT1表达呈正相关。结论:NEAT1可以作为影响结直肠癌发生发展的重要因子,在体内组织学水平和体外细胞水平调控结直肠癌细胞的增殖和侵袭等情况,从而影响结直肠癌患者的预后,且其功能的发挥部分依赖于SIRT1;即NEAT1通过与SIRT1竞争结合miR-34a发挥对SIRT1的调控作用。