人脂肪干细胞膜片片段促进大鼠牙槽骨缺损再生修复的研究

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyaohuaok
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目的:构建人脂肪来源干细胞(human adipose-derived stem cells,h ADSCs)膜片片段(cell sheet fragment,CSF)与富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)碎片复合移植物,注射至大鼠下前牙牙槽骨缺损区,检测牙槽骨修复效果,旨在探索一种微创且高效的修复牙槽骨缺损的方法。方法:培养h ADSCs并构建细胞膜片,同时制备PRF,将二者切割为0.5mm×0.5mm的碎片,共培养7天后得到CSF/PRF复合体。在SD大鼠下颌左侧前牙区构建6mm×2mm×0.5mm的牙槽骨缺损区,手术3天后分组注射细胞移植物CSF/PRF、CSF、h ADSCs,并设空白对照组。分别于注射2周、4周处死大鼠,进行大体观察,MicroCT扫描检测牙槽骨再生体积,HE染色、Masson染色观察新生骨组织形态,并测量分析骨成熟度,RT-PCR检测成骨相关基因的表达。结果:1.注射后2周和4周,大体观察可见CSF/PRF组牙槽骨再生情况优于其它三组。2.Micro-CT扫描分析得出注射后2周和4周,CSF/PRF组新生骨体积均高于其它三组,差异具有统计学意义(P<0.05)。3.HE染色发现CSF/PRF组新生牙槽骨量更高,其中可见新生血管。Masson染色分析结果显示CSF/PRF组新生牙槽骨成熟度更高(P<0.05)。4.RT-PCR结果显示,注射后2周,CSF/PRF组的BMP-2、Runx2、OCN和Col-I表达量均显著高于空白对照组和h ADSCs组(P<0.05)。注射后4周,CSF组和CSF/PRF组的BMP-2、Runx2、OCN和Col-I的表达量均显著高于空白对照组和h ADSCs组(P<0.05)。结论:应用CSF/PRF复合体局部微创注射可促进大鼠牙槽骨缺损的再生修复,这种细胞移植方式可显著提高h ADSCs的成骨作用,为牙槽骨缺损提供新的治疗方法和理论依据。
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