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目的：(1)构建人胰腺癌细胞系MIA Paca-2/DRGs的共培养模型,为胰腺癌神经侵袭的研究提供新的可量化的体外模型。(2)观察胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)在胰腺癌细胞神经侵袭中的作用及阻断效果,探讨其诱导神经侵袭的可能的作用机制。方法：(1)培养人胰腺癌细胞系MIA Paca-2细胞并通过RT-PCR方法检测RET基因的表达,制备大鼠背根神经节(DRGs)并通过RT-PCR方法检测GDNF基因的表达,将MIA Paca-2细胞与大鼠DRGs培养于同一培养皿中,建立MIAPaca-2/DRGs体外共培养模型,观察胰腺癌细胞与DRGs神经突的生长情况及相互影响,观察胰腺癌细胞神经侵袭的动态过程。(2)MTT方法分别检测促分裂原活化蛋白激酶通道(MAPK)阻断剂PD98059和磷脂酰肌醇3激酶通道(P13K)阻断剂LY294002在不同浓度、不同作用时间条件下对胰腺癌细胞MIA Paca-2存活率的影响,利用Trans-well装置在boyden小室的下室中分别加入不同的细胞因子(GDNF、GDNF抗体、PD98059、LY294002),通过计数各组跨膜细胞的数量并进行统计学分析,检测GDNF对胰腺癌细胞的趋化作用和PD98059、LY294002的阻断效果。结果：(1)RT-PCR方法检测MIA Paca-2与DRGs中分别有RET及GDNF基因的表达。在MIA Paca-2/DRGs共培养体系中,胰腺癌细胞比单独培养者形成更多的细胞集落,神经节周围则出现更多的神经突生长,胰腺癌细胞与神经突出现互相吸引的趋化性生长,胰腺癌细胞向神经节方向发生迁移,并沿着神经节周围生长最终包绕神经节。(2)MTT实验中,培养基中分别加入不同浓度的PD98058或LY294002后,在不同作用时间下胰腺癌细胞形态未发生明显改变,各组的细胞存活率并没有显著差异,总体水平大都维持在90%-100%之间,且随药物作用时间或药物浓度变化均无明显规律性变化。Trans-well实验中,下室中加入GDNF后增加了Boyden小室跨膜细胞数量,加入阻断剂PD98059后跨膜细胞数量明显减少,差异有统计学意义(P=0.014),加入阻断剂LY294002后跨膜细胞数量明显减少,差异无统计学意义(P=0.221),加入两种阻断剂后跨膜细胞数量最少,差异有统计学意义(P<0.001)。结论：(1)成功构建了人胰腺癌细胞系MIA Paca-2/DRGs的共培养模型,胰腺癌神经侵袭是神经细胞与胰腺癌细胞的相互作用的结果,为胰腺癌神经侵袭的进一步研究提供了直观的可量化的体外模型。(2)GDNF可增强胰腺癌细胞MIA Paca-2的侵袭转移能力,发挥这一作用的途径可能与促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通道和磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通道有关。