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目的:宫颈上皮内瘤变(CIN)是与宫颈癌(CC)关系密切的一系列前驱病变。要研究CIN,必须要有一个稳定良好的细胞模型。携带HPV16/E6E7病毒的永生化宫颈鳞状细胞Ect1/E6E7模型可作为体外细胞模型进行生物学研究。探讨叶酸对Ect1/E6E7细胞生物学特征以及宫颈病变相关标志物E-钙粘蛋白(E-Cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达的影响,进而分析叶酸对宫颈癌前病变的影响。方法:1.使用组织法、酶消法体外培养建立CIN细胞模型,利用免疫荧光技术进行鉴定;2.常规培养宫颈永生化鳞状细胞Ect1/E6E7,将Ect1/E6E7细胞株进行复苏,传代实验;3.叶酸浓度0、10、100、200、1000、2000nM分组分别干预Ect1/E6E7细胞24h、48h,用MTT法检测叶酸对Ect1/E6E7细胞的抑制率,检测不同浓度叶酸对Ect1/E6E7细胞增殖的影响;4.Western Blot检测叶酸浓度0、10、100、200、1000、2000nM分组培养的Ect1/E6E7细胞中E-Cadherin、Vimentin的表达情况。结果:1.进行的体外CIN细胞原代培养实验,原代细胞培养时间长,细胞生长不理想,无法稳定传代进行后续实验。2.MTT法检测不同浓度叶酸对Ect1/E6E7细胞干预结果显示:相同叶酸浓度下干预不同的时间,两组之间抑制率有统计学意义(P<0.05);相同干预时间下,不同叶酸浓度的两组之间抑制率有统计学意义(P<0.05)。干预24h,Ect1/E6E7细胞在叶酸浓度为200nM增殖较快,大于200nM时,细胞增殖速率降低;干预48h,Ect1/E6E7细胞在叶酸浓度为200nM时增殖较快,随后浓度升高,增殖率下降。3.Western Blot检测结果显示:叶酸浓度0、10、100、200、1000、2000nM时,Vimentin相对表达水平分别为1.097±0.038,0.874±0.04,0.967±0.036,0.856±0.07,0.732±0.032,0.634±0.043,E-Cadherin的相对表达量分别是:0.831±0.028,1.180±0.075,1.073±0.018,1.045±0.078,1.032±0.074,1.066±0.043,其中,与对照组(0nM)相比,不同浓度叶酸干预组Vimentin表达水平下降,差异均有统计学意义(P值分别为0.002,0.013,0.006,0.001,0.001);与对照组(0nM)相比,不同浓度叶酸干预组E-Cadherin表达水平上升,差异均有统计学意义(P值分别为0.002,0.001,0.011,0.012,0.001)。提示随着叶酸浓度增高,Ect1/E6E7细胞中Vimentin表达降低,E-Cadherin的表达增高。结论:高浓度的叶酸环境抑制Ect1/E6E7细胞的增殖,抑制Ect1/E6E7细胞中Vimentin的表达,促进E-Cadherin的表达增高。叶酸对宫颈癌前病变细胞的恶性进展具有一定的保护作用。