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辣椒(Capsicum annuum L.)是一种很重要的蔬菜作物,既可直接生食,也可以作为调味品,具有丰富的营养价值和经济价值,广泛栽培于世界各地。但由于恶劣的自然环境的影响和近年来病虫害的频繁发生,大大降低了辣椒的产量和品质。因此,关于如何提高辣椒的抗逆、抗病性的研究工作已成为重要的科技课题。随着分子生物学的不断深入,辣椒育种工作的方式方法也逐渐变得更加多样和成熟。烟草的NPK1基因是参与细胞周期调控的MAPKKK激酶,在植物的生长发育调节和抗逆等生理过程中起重要作用。本试验试图通过农杆菌介导的遗传转化方法把NPK1基因导入辣椒中,旨在建立和优化农杆菌介导辣椒遗传转化技术,为研究辣椒基因功能奠定基础。以9个辣椒(Capsicum annuum L.)品种为材料,对辣椒高频再生体系的建立进行了系统研究与比较分析。并以其中3个再生能力好的品种为试材,对影响农杆菌转化的诸因素、再生植株筛选与鉴定方面进行了较为系统的研究分析。在此基础上,以辣椒子叶为外植体,通过农杆菌介导的遗传转化方法将NPK1基因导入辣椒,获得转基因再生植株。其主要结果如下:1.不同辣椒品种的再生能力差别较大,其中以品种B17、P41和P54的分化能力最强;辣椒植株离体再生体系中,较高的6-BA/IAA值有利于辣椒外植体的分化再生,而6-BA/IAA值较低则适合于再生芽的伸长;辣椒子叶和带柄子叶的再生能力比下胚轴强,是较好的外植体材料;不同苗龄的子叶再生能力也有差异,以12-16d苗龄的外植体为好;高频率的不定芽分化培养基为MS无机成分+B5有机成分+0.5mg/L IAA +5.0mg/L 6-BA;不定芽伸长的适宜培养基为MS无机成分+B5有机成分+ 0.5mg/L IAA + 1.5mg/L 6-BA + 2.0mg/L GA3;高效生根诱导培养基为MS无机成分+B5有机成分+0.2mg/L IAA + 0.1mg/L NAA。2.农杆菌介导辣椒遗传转化的适宜条件是:切取14d苗龄子叶外植体,在MS无机盐成分+B5有机成分+0.5mg/L IAA+5.0mg/L 6-BA的琼脂培养基上预培养2d后,浸没于农杆菌菌液中侵染8-10min,共培养于MS无机盐成分+B5有机成分+0.5mg/L IAA +5.0mg/L 6-BA上2d后,转移至延迟培养基MB+0.5mg/L IAA +5.0mg/L 6-BA +250mg/L Cef延迟选择2d,随后转移至MB+0.5mg/L IAA+5.0mg/L 6-BA +250mg/L Cef+50mg/L Km进行选择培养。3.试验共获得抗性植株48株,PCR检测获得阳性植株17株,RT-PCR检测获得转基因植株14株。