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对虾养殖业的发展面临着病害严重和环境恶化的严重挑战。对虾细菌和病毒性疾病的频发已给对虾的养殖业造成了严重损失。养殖环境恶化造成的环境胁迫,不但影响对虾的生长性状,而且导致对虾的抵抗力下降,更容易引发病害的发生。研究对虾在外界胁迫(环境胁迫、病原感染)后蛋白表达模式的变化有助于弄清对虾的抗病抗逆机理,为抗病抗逆对虾的培育提供理论依据。肝胰脏是对虾的重要器官,参与各种重要的生理活动包括消化、吸收、储存和代谢,并且在启动对虾免疫反应起重要作用,其蛋白质表达的变化与对虾的健康状况密切相关。本研究运用蛋白质组学技术平台(双向电泳、串联质谱、数据库搜索),对中国明对虾肝胰脏蛋白进行研究,获得了一些重要进展,结果如下:1.初步构建了覆盖范围广、分辨率高、重复性好的中国明对虾肝胰脏双向电泳参考图谱,并利用质谱分析和多种数据库搜索方法成功鉴定了122个(68种)蛋白质点,包括14个(9种)能量代谢蛋白、15个(9种)氨基酸代谢蛋白、10个(5种)碳水化合物代谢蛋白、2个(1种)多聚糖代谢蛋白、11个(5种)辅酶和维生素代谢蛋白、1个(1种)脂类代谢蛋白、5个(3种)核酸代谢蛋白、7个(3种)消化酶、3个(1种)细胞骨架蛋白、14个(8种)免疫相关蛋白、9个(6种)抗氧化蛋白、19个(7种)伴侣蛋白、4个(3种)信号转导蛋白、3个(3种)翻译功能蛋白和5个(4种)未分组蛋白。2.在参考图谱的基础上,研究了缺氧胁迫下中国明对虾肝胰脏蛋白质表达模式的变化,成功鉴定了52个(15个上调、37个下调)差异表达的蛋白,包括11个能量产生相关蛋白、13个免疫相关蛋白、11个代谢相关蛋白、6个抗氧化蛋白、7个分子伴侣、2个细胞骨架蛋白和2个未分类蛋白,利用实时定量PCR技术,研究了缺氧胁迫下10个差异蛋白的基因在转录水平上的变化;同时研究了金属镉胁迫后中国明对虾肝胰脏蛋白质表达模式的变化,成功鉴定了29个(4个上调、25个下调)差异表达的蛋白,包括9个能量产生相关蛋白、3个免疫相关蛋白、9个代谢相关蛋白、5个抗氧化蛋白、2个分子伴侣和1个未分类蛋白。3.分别进行了灭活鳗弧菌和WSSV感染后中国明对虾肝胰脏的差异蛋白质组学研究。灭活鳗弧菌刺激后,45个差异表达的蛋白质(4个上调、41个下调)被成功鉴定出,包括6个能量产生相关蛋白、4个免疫相关蛋白、22个代谢相关蛋白、4个抗氧化蛋白、7个分子伴侣、1个翻译相关蛋白和2个未分类蛋白;WSSV感染后, 48个差异表达的蛋白质(11个上调、37个下调)被成功鉴定出,包括7个能量产生相关蛋白、9个免疫相关蛋白、20个代谢相关蛋白、5个抗氧化蛋白和7个分子伴侣。通过对上述实验数据的分析,初步探讨了中国明对虾对虾对环境胁迫和病原感染的应答机理。为下一步筛选中国明对虾环境胁迫及免疫应答关键蛋白并研究其功能奠定了基础。