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目的椎间盘退行性疾病目前缺乏十分有效的治疗方法,随着分子生物学的发展,人类逐渐研究在基因层面治疗椎间盘退变的方法。mi RNA作为小分子非编码RNA,参与多种疾病的病理生理学过程,如肿瘤细胞的增殖、成骨细胞的分化和髓核细胞的凋亡等。此前就有研究mi RNA-17家族中mi RNA-17-3p在退变的髓核细胞中低表达,影响椎间盘的变性,而mi RNA-17-5p也是mi RNA-17家族中的一员,在多个组织中均有表达,而且在不同的组织中表现出不同的功能。但是否在退变的椎间盘中表达及其在椎间盘变性进展中的何种潜在作用,目前未有研究明确表明。这项研究的目的就mi RNA-17-5p在退变的椎间盘是否存在异常表达以及其对影响髓核细胞外基质降解的可能机制进行探究。方法应用RT-q PCR技术检测临床样本(实验组和对照组)中mi RNA-17-5p的表达水平,分析其表达量与椎间盘退变程度的相关性。应用IL-6不同浓度(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml)处理髓核细胞模拟炎症损伤模型,在不同时间(4h、12h、24h、36h、48h)采用CCK-8法分析髓核细胞活力,筛选IL-6合适的浓度和处理时间,并用RT-q PCR分析IL-6对mi RNA-17-5p、炎症介质(IL-1、TNF-α)和基质金属蛋白酶3(MMP-3)表达水平的影响。转染制作mi RNA-17-5p mimics和inhibitor及NC组,并用RT-q PCR和Western Blot分析mi RNA-17-5p过表达或低表达对炎症介质(IL-6、IL-1、TNF-α)和IL-6/STAT3通路下游蛋白(p-STAT3、MMP-2)的影响。结果实验组中退变髓核组织与对照组相比,mi RNA-17-5p的表达水平明显减少(P<0.01),而且随着椎间盘退变程度的增加,mi RNA-17-5p的表达水平不断减少,二者存在明显负相关(r=-0.95,P<0.01)。与对照组相比,可见IL-6 1ng/ml组与空白对照组相比无明显差异(24h、48h,P>0.05),IL-6 10ng/ml组与空白对照组相比细胞数明显降低(24h、36h、48h,P<0.05)。后续实验中RT-q PCR显示IL-6处理后显著降低了mi R-17-5p的表达(P<0.05),但是明显升高了IL-1、TNF-α(P<0.05)和MMP-3(P<0.01)的水平。在mi R-17-5p mimics转染后的髓核细胞中IL-1、IL-6、TNF-α的表达水平显著降低(P<0.01),而在mi R-17-5p inhibitor转染的髓核细胞中显著增高(P<0.01)。蛋白免疫印迹实验结果显示ACAN、COL2A1的水平在mi R-17-5p inhibitor组中明显下降(P<0.05),而在mi R-17-5p mimics组中显著增加(P<0.05);此外,p-STAT3和MMP-2则出现相反的表达趋势,即p-STAT3、MMP-2的水平在mi R-17-5p inhibitor组中明显增加(P<0.05),而在mi R-17-5p mimics组中显著减少(P<0.05)。结论低表达mi R-17-5p能促进髓核细胞中炎症反应以及髓核细胞外基质的降解,这可能是通过激活IL-6/STAT3信号通路和促进基质金属蛋白酶3(MMP-3)的分泌来实现的,从而参与椎间盘的变性过程。