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目的:通过建立小鼠自发流产模型组和正常妊娠组,分别检测NK、Treg和Th17等免疫细胞及其分泌的重要炎性因子,探讨上述细胞在维持胎盘局部免疫耐受中的作用以及自发流产的发生机制。 方法: (1)构建小鼠正常妊娠组(CBA/J♀×BALB/c♂)和自发流产模型组(CBA/J♀×DBA/2J♂)。 (2)于不同孕期(孕5天、10天和15天),统计各组孕鼠流产率和胎盘吸收率(包括胎 盘坏死、出血等情况)。 (3)流式细胞术检测小鼠外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg所占的比例;免疫荧光及免疫组织化学法检测子宫蜕膜Treg细胞表面Foxp3分子、Th17细胞IL-17以及NK细胞NK1.1和CD49b的表达情况,检测结果进行组间比较。 结果:自发流产模型组孕鼠流产率明显高于正常妊娠组,解剖孕鼠时可观察到胎盘坏死、出血等情况。流式细胞术检测结果表明,孕10d和15d时自发流产模型组孕鼠外周血淋巴细胞中Treg细胞比例低于正常妊娠组(P<0.05)。免疫组化和免疫荧光实验结果显示,自发流产模型组孕鼠蜕膜组织中Treg细胞的重要调节因子Foxp3分子表达水平较正常妊娠组低(孕15天时差异尤为明显),而IL-17却表达升高,同时免疫荧光实验结果显示自发流产模型组小鼠蜕膜组织中NK1.1、CD49b表达水平高于正常妊娠组。 结论:本研究结果提示Treg/Th17之间的动态平衡以及NK细胞的活化、杀伤功能与自发流产模型孕鼠(CBA/J♀×DBA/2J♂)妊娠失败密切相关。