本研究用裸鼠尾静脉注射法、组织块培养法获得粘液表皮样癌裸鼠脊髓转移细胞系，应用光镜及电镜下形态学观察、染色体分析、细胞计数法、流式细胞术、软琼脂克隆形成试验、裸鼠皮下成瘤实验和人工肺转移模型等方法，探讨了粘液表皮样癌脊髓转移细胞系的生物学特征，并比较了其与Mc3细胞的差别。 一、粘液表皮样癌脊髓转移细胞系Ms的建立 1．将对数生长期的Mc3细胞单细胞悬液，每只裸鼠尾静脉注射含5×10~6个细胞，共注射50只， 2．注射56日后观察到有一只裸鼠出现了双侧后肢截瘫。 3．脱颈法处死截瘫小鼠，经解剖未发现肉眼可见的肺、肝、脑、脊髓异常。 4．分别取其脊髓、肺、肝、脑组织用含10％(v／v)的胎牛血清的RPMl1640培养液，行组织块法原代培养。 5．于3日后仅脊髓组织块周围长出了扁平多角形上皮细胞样细胞，呈“铺路石”样外观 6．该细胞在体外的生长稳定，已传代50次以上，体外培养已维持2年，命名为粘液表皮样癌脊髓转移细胞系简称Ms(其M代表 muoCpldermoid，s代表 Spnlnl cod）。 二、地细胞的生物学特性 1、形态学观察结果：MS细胞核浆比增大，核仁增大增多，可见巨 核、多核细胞，核分裂像多见。透射电镜观察Ms细胞多呈圆形，核浆 比例大，细胞核巨大不规则，可见切迹，以常染色质为主，核仁较大， 可见大量细胞器，其中线粒体和内质网丰富、大量粘液颗粒样颗粒， 微绒毛丰富。与Ms细胞相比，Me3细胞形态多样、细胞间大小差异 较大。 2、染色体分析结果：Ms和Me3细胞染色体都保持了人类染色体 （ 的形态特征，前者染色体数目37～119，众数60。后者细胞染色体数目 25～113，众数 61。 3、细胞增值速度的测定结果：MS细胞对数生长期群体倍增时间 为43h，M。3为38h。 4、细胞周期测定结果：流式细胞仪测得MS细胞对数生长期的细 胞周期分布为：GI期61．8％，GZ期9．3％，S期22．7％，MC3细胞则分 别为＊期 62．3％，GZ期 11．5％S期 26．l％。 5、克隆形成率 MS细胞克隆形成率为41％；MC3为38％。两种细胞 形成克隆形态均为球状和单层细胞片状，形态相似。 6、MS肿瘤细胞裸鼠皮下致瘤性4／4，瘤体倍增时间41h MC3细胞致瘤性4／4，瘤体倍增时间44h。皮下肿瘤组织学特征相似。 7、MS细胞裸鼠人工肺转移率为3／3，肺转移结节数68土48；MC3转移率为 3／3，肺转移结节数 42士23；两者肺转移灶组织病理特点相同。