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仔猪水肿病是一种较常见的传染病，能引起断奶仔猪四肢麻痹、步态蹒跚、痉挛和昏迷等神经症状，死亡率很高。剖检可见胃壁和肠系膜水肿，因此称之为“水肿病”。随着近几十年的深入研究，人们对水肿病的致病机理有了比较详细的了解，明确了仔猪水肿病的发生与产vero细胞毒素大肠杆菌的两个致病因子——F18ab（F107）菌毛与志贺样毒素Ⅱ型变异体（SLT-Ⅱe）密切相关，因此将两者在同一表达载体中联合表达，可为深入研究两者的免疫生物学特性提供可靠的试验依据，也为研制高效预防仔猪水肿病疫苗打下良好的基础。 本研究制备获得了针对SLT-ⅡeA亚单位的单克隆抗体，利用实验室现有的SLT-ⅡeA亚单位重组表达菌pSLT-ⅡeA在2×YTA培养后，经IPTG诱导表达融合蛋白GST-SLT-ⅡeA，经谷胱苷肽活化的Sepharose 4B亲和层析柱提纯后测定浓度，作为免疫原免疫BALB／c小鼠。以经诱导表达融合蛋白的重组菌、未经诱导不表达融合蛋白的重组菌及仅表达载体蛋白GST的重组菌三者的裂解产物包被ELISA板，细胞融合后培养基上清经检测获得1株针对SLT-Ⅱe A亚单位的杂交瘤细胞，命名为A2-D3，制备的单抗腹水ELISA效价为24 log 2，免疫印迹结果表明此单抗仅与融合蛋白反应，而与载体蛋白不反应。利用此单抗经Western-blotting检测13个水肿病菌株，发现均产生志贺样毒素Ⅱ型变异体。 用PCR技术对F107／86标准株扩增F18ab菌毛主要亚单位A（FedA）的510bp的基因序列（fedA），并将PCR扩增片段在EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ酶切位点克隆进pGEX-6P-1质粒载体，获得重组质粒pF107，将此质粒转化大肠杆菌BL21，诱导表达融合蛋白GST-F107。利用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ酶切位点将SLT-ⅡeA基因序列从已有的重组表达质粒pSLT-ⅡeA中切出亚克隆入pF107下游，获得重组表达质粒pFSLT-ⅡeA，转化大肠杆菌BL21，用IPTG进行诱导表达，通过对重组大肠杆菌pFSLT-ⅡeA的菌体裂解物的SDS-PAGE电泳分析及Western-blotting鉴定，表明重扬州大学硕士学位论文组菌正确表达了F18ab菌毛A亚单位和SLT一neA亚单位的联合表达产物。 为了研究联合表达产物的免疫学特性，我们用ICR小鼠进行了免疫原性试验。已诱导表达后的重组菌菌体裂解物乳化后两次免疫小鼠，二次免疫后8天眶静脉采血做ELisA，检测抗体效价，同时设立PSLT·neA、pF 1 07重组菌诱导表达产物的对照组。结果表明:本重组菌能有效对小鼠进行保护，保护率达到7/8。