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目的:
观察脂肪乳剂、肾上腺素单独及复合治疗布比卡因诱导的离体大鼠心脏停搏的复苏效应和对复苏后心脏功能的影响;并探讨脂肪乳剂逆转布比卡因心脏毒性可能的作用机制。
方法:
第一部分:脂肪乳剂、肾上腺素单独及复合治疗布比卡因诱导的离体大鼠心脏停搏的复苏效应及机制研究。
Sprague-Dawley雄性大鼠48只,随机分成四组:A组(脂肪乳剂组)、B组(肾上腺素组)、C组(脂肪乳剂复合肾上腺素组)、D组(对照组),每组12只。建立Langendorff离体心脏灌注模型。平衡灌注25min之后,以100μmol/L布比卡因诱导心脏停搏后继续灌注3min,造模成功。之后A组改用含30μmol/L布比卡因及2%脂肪乳剂的K-H液灌注心脏;B组改用含30μmol/L布比卡因及0.15ug/ml肾上腺素的K-H液灌注心脏;C组改用含30μmol/L布比卡因及2%脂肪乳剂复合0.15ug/ml肾上腺素的K-H液灌注心脏;D组改用含30μmol/L布比卡因的K-H液灌注心脏。四组中能复跳的离体心脏于复跳后继续观察40min,对未复跳的心脏在造模后观察40min。
记录四组停搏所需时间(Ts)及造模成功至复跳时间(Tr);记录每组心脏造模成功后复跳的例数及造模成功后3min内复跳(早期恢复)的例数;记录停跳前及复跳后40min内的心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、心率-左心室发展压乘积(RPP)、左心室内压最大变化速率(±dP/dtmax)、冠脉流出量(CF);记录心脏在复跳后40min内RPP达到的最大值(RPPh),及该值与平衡末(Tb)时RPP值的比值(RPPr)。四组中能复跳的心脏于观察末取心肌测定ATP、ADP、AMP含量,并计算腺嘌呤核苷酸总量(TAN)及能荷(EC),以及测定心肌组织中布比卡因浓度。
第二部分:脂肪乳剂对离体大鼠心脏心功能和心肌腺苷酸含量的影响。
Sprague-Dawley雄性大鼠24只,随机分成两组:E组(K-H液组)、F组(K-脂肪乳剂组),每组12只。建立Langendorff离体心脏灌注模型。以K-H液平衡灌注25min之后:E组继续以K-H液灌注心脏40min;F组改用含2%脂肪乳剂的K-H液灌注心脏40min。
记录大鼠心脏在平衡末及继续灌注40min内的HR、LVDP、RPP、±dP/dtmax、CF;两组观察末分别取心肌测定ATP、ADP、AMP含量,并计算TAN及EC。
第三部分:布比卡因致离体大鼠心脏停搏时心肌腺苷酸含量的测定。
Sprague-Dawley雄性大鼠24只,随机分成两组:G组(平衡25min组)、H组(停搏3min组),每组12只。建立Langendorff离体心脏灌注模型。G组以K-H液平衡灌注25min后,立即取心肌置液氮中冻存;H组以K-H液平衡灌注25min后,改用100μmol/L布比卡因致心脏停搏后继续灌注3min,之后取心肌置液氮中冻存。
记录大鼠心脏在平衡末时的HR、LVDP、RPP、±dP/dtmax、CF;冻存的心肌测定ATP、ADP、AMP含量,并计算TAN及EC。
结果:
1.A、B、C、D四组大鼠心脏复苏情况比较
1.1四组复跳例数及复跳时间比较:
1.1.1造模成功后A、B、C、D组复跳的例数分别为12例、12例、12例、5例,A组、B组、C组显著多于D组(P<0.01)。
1.1.2造模成功后3min内A、B、C、D组复跳的例数分别为12例、8例、12例、2例,A组、C组显著多于D组(P<0.01)。
1.1.3 A组、C组心脏复跳时间显著短于B组、D组(P<0.05或0.01)。
1.2四组复跳后主要心脏功能指标变化:
1.2.1复跳后25min内HR四组之间比较差异均有统计学意义,从高到低依次为C组>A组>B组>D组(P<0.05或0.01);复跳后30-40minHR组间比较从高到低依次为C组、A组>B组>D组(P<0.05或0.01)。
1.2.2复跳后20min内RPP组间比较从高到低依次为C组>(A组、B组)>D组(P<0.05或0.01);复跳后25~40min A组、B组、C组的RPP均显著高于D组(P<0.01)。
1.2.3复跳后40min内RPPh及RPPr组间比较从高到低依次为C组>(A组、B组)>D组(P<0.01)。
2.A组、C组心肌组织中布比卡因浓度显著低于B组、D组(P<0.01)。
3.A、B、C、D四组大鼠心肌组织腺苷酸含量及能荷的比较:
D组的ATP含量显著高于B组、C组(P<0.05或0.01),A组、D组的ADP含量显著高于B组(P<0.05),A组、C组的AMP含量显著高于D组(p<0.05),D组的TAN含量显著高于B组、C组(P<0.05),D组的EC值显著高于A组、C组(P<0.05或0.01)。
4.E、F两组在平衡末及继续灌注40min内各时间点的HR、LVDP、RPP、±dP/dtmax、CF比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
5.E、F两组心肌组织中的ATP、ADP、AMP、TAN含量及EC值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
6. G、H两组心肌组织中的ATP、ADP、AMP、TAN含量及EC值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论:
1.脂肪乳剂复合肾上腺素治疗布比卡因诱导的离体大鼠心脏停搏,较之单纯脂肪乳剂或肾上腺素,能更好得改善复苏后的心脏功能。
2.脂肪乳剂能使与心肌细胞结合的布比卡因从心脏组织中脱离,从而降低心肌布比卡因浓度,心肌细胞的功能得以迅速恢复,是其逆转布比卡因心脏毒性的主要作用机制。