中药苍耳子治疗变应性鼻炎的药效学评价

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目的《中国药典》2015版收载的治疗鼻炎、鼻窦炎以及变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)的30种临床常用中成药中,含有中药苍耳子的有23种。作为治疗鼻炎、鼻窦炎以及变应性鼻炎的常用药,苍耳子具有散风寒、通鼻窍、祛风湿的功效。为深入研究其“通鼻窍”药效,本研究通过体内动物药理学,观察苍耳子水煎液对于AR模型豚鼠的治疗作用;通过体外细胞药理学,应用其含药血清对细胞过敏模型和细胞炎症模型的影响,分析其抗炎、抗过敏活性,为综合评价苍耳子对于变应性鼻炎的治疗作用提供依据。方法1.建立以鸡卵清蛋白(oval bumin,OVA)与氢氧化铝(Al(OH)3)混悬液致敏实验豚鼠,建立AR动物模型,实验分为:正常组、模型组、西药对照组、中药对照组、苍耳子水煎液高(4 g/kg)、中(2 g/kg)、低(1 g/kg)剂量组。模型建立成功后,给药14 d,观察给药期间实验豚鼠鼻部行为学症状并评分;经染色后显微镜下观察实验豚鼠鼻黏膜组织病理变化;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测实验豚鼠血清中免疫球蛋白E(Immunoglobulin,Ig E)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)以及干扰素-γ(Interferon gamma,IFN-γ)含量。2.以Ig E、牛血清白蛋白(BSA)致敏并激发大鼠嗜碱性粒细胞(RBL-2H3),建立细胞过敏模型,将实验分为:正常组、空白对照组、模型组、空白血清组以及2 h、4 h、6 h、12 h、24 h含药血清组。四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测RBL-2H3细胞增殖以及含药血清对RBL-2H3细胞活力的影响,活性比色法检测β-氨基己糖苷酶(β-HEX)释放率,ELISA法检测组胺释放量。3.以脂多糖(LPS)刺激小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7),建立细胞炎症模型,将实验分为:正常组、空白对照组、模型组、空白血清组、2 h含药血清组、4 h含药血清组、6 h含药血清组、12 h含药血清组、24 h含药血清组。MTT法检测RAW264.7细胞增殖以及含药血清对RAW264.7细胞活力的影响,ELISA法检测模型细胞分泌IL-4、IL-17以及IFN-γ的含量。结果1.AR模型组豚鼠不仅出现挠鼻不止,喷嚏不断,还出现流涕、呼吸急促等症状,行为学评分较高;且模型组豚鼠鼻黏膜组织病理变化明显,上皮组织出现明显脱落,大量炎性细胞、嗜酸性粒细胞浸润;血清中Ig E、IL-4含量水平显著升高(P<0.05)而IFN-γ水平显著下降(P<0.05);与模型组相比,苍耳子水煎液各浓度剂量组均可不同程度降低模型豚鼠鼻部行为学评分,改善AR模型组豚鼠鼻黏膜病理变化,明显降低血清中Ig E、IL-4水平(P<0.05),升高IFN-γ水平(P<0.05)。2.MTT实验确定了苍耳子含药血清对RBL-2H3细胞无毒性作用;模型组细胞明显释放大量β-HEX和组胺(P<0.05),各时间段含药血清均可抑制β-HEX释放,明显抑制组胺释放(P<0.05)。3.基于体外炎症细胞模型的研究:通过MTT实验确定苍耳子含药血清对RAW264.7细胞无毒性作用;模型组细胞经LPS刺激后,IL-4以及IL-17的含量水平显著提高(P<0.05),IFN-γ含量水平显著降低(P<0.05),各时间段含药血清均显著降低IL-4以及IL-17的含量水平(P<0.05),升高IFN-γ含量水平(P<0.05)。结论基于AR豚鼠的体内药效学研究结果表明:苍耳子各剂量组均可改善AR豚鼠过敏性行为症状;均可改善鼻黏膜上皮组织脱落和组织水肿现象、均可减少炎性细胞浸润;均可明显降低血清中Ig E、IL-4含量水平,明显升高IFN-γ含量水平,从而发挥对AR豚鼠的治疗作用。基于过敏细胞模型、炎症细胞模型的体外药效学研究结果表明:苍耳子水煎液具有良好的抗炎、抗过敏活性,其含药血清能明显降低RBL-2H3细胞上清液中β-HEX和组胺含量水平;明显降低RAW264.7细胞上清液中IL-4和IL-17含量水平,明显升高IFN-γ含量水平。
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