背景和目的:骨肉瘤（Osteosarcoma,OS）是一种起源于间充质干细胞恶性肿瘤,多发病于儿童和青少年。尽管当前医疗手段已经显著提高了骨肉瘤患者的5年生存率,但是骨肉瘤的复发、转移和化疗耐受仍然是阻碍治疗效果进一步提高的主要原因。而骨肉瘤的转移是造成患者死亡的主要原因,因此寻找有效的抑制肿瘤细胞增殖和迁移的潜在靶点,并明确其潜在的分子机制对于改善骨肉瘤患者的治疗效果和预后至关重要。p38γ是 p38 MAPK（Mitogen Activated Protein Kinase,丝裂原活化蛋白激酶）的四个亚型之一,多表达于骨骼肌组织中。近年来有研究发现p38γ在多种恶性肿瘤中高表达,提示p38γ在肿瘤的发生发展中具有重要的作用,但p38γ对骨肉瘤的影响及相关机制尚无相关研究报道。本研究拟阐明p38γ是否参与骨肉瘤发生发展及其生物学效应,初步探索p38γ参与骨肉瘤发生发展的分子机制,为骨肉瘤的治疗提供潜在的靶点。方法和内容:收集骨肉瘤患者肿瘤及瘤旁组织,提取组织总蛋白和总RNA,通过蛋白免疫印迹（Western blot）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测p38γ表达差异,然后在原代人骨肉瘤细胞及OS细胞系中敲减（靶向shRNA）或CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除p38γ,通过CCK-8、EdU和Transwell等方法检测上述细胞的生长、增殖和迁移能力,通过Western blot和流式细胞术检测等方法检测上述细胞的凋亡情况。其次,在原代人OS1细胞中过表达p38γ,通过上述方法检测OS1细胞的生长、增殖和迁移,以及OS1细胞中视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白（Rb）磷酸化、细胞周期相关蛋白（cyclin E1、cyclin A）的表达情况,靶向shRNA敲减cyclin E1、cyclin A,通过上述方法检测稳转细胞的增殖和迁移。最后,在裸鼠皮下注射两种病毒稳转U2OS细胞（shRNA C、p38γ shRNA）,每7天检测裸鼠的肿瘤体积和体重,计算肿瘤增长速度和体重变化情况,以及42天后通过免疫组织化学等方法分析皮下成瘤的肿瘤中p38γ的表达情况。结果:通过检测骨肉瘤患者肿瘤组织及瘤旁组织、OS细胞系（U2OS）、原代人OS细胞（OS1,OS2,OS3）以及成骨细胞中p38γ的mRNA和蛋白,发现p38γ在人骨肉瘤组织和细胞中均上调。在原代人骨肉瘤细胞及OS细胞系中敲减或敲除p38γ,OS细胞生长、增殖和迁移能力被显著抑制,同时OS细胞中Caspase-3活性增强,细胞凋亡增加。过表达p38γ后,细胞的增殖、迁移能力均显著提升;同时,骨肉瘤细胞中磷酸化Rb表达增加,cyclin E1、cyclin A的表达升高。反之,则抑制其表达。同时本论文发现cyclin E1、cyclin A的敲减抑制了 OS细胞的增殖和迁移,最后我们通过皮下成瘤实验发现,慢病毒敲减p38γ明显抑制了肿瘤体积的增加和肿瘤细胞的增殖。结论:本研究结果提示p38γ在骨肉瘤细胞的生长、增殖和迁移中具有关键作用,进而阐明p38γ通过靶向调控视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白和细胞周期蛋白E1/A介导骨肉瘤的发生发展,为更好地了解骨肉瘤的进展和发现新的治疗靶点提供了思路。