多西紫杉醇(Docetaxel，商品名为Taxotere)是新一代抗肿瘤药物，它与紫杉醇(Paclitaxel，商品名为Taxol)同属紫杉烷类，均为FDA批准的紫杉烷类抗癌药物。其作用机制是通过刺激导管素的聚合，促进微管双聚体装配成微管并致使微管超稳定而抑制微管网动力学重组，最终使细胞增殖停止在有丝分裂静止期(G2／M)的阶段。多西紫杉醇新颖的作用机制及其在临床研究中显示出的独特疗效，使得多西紫杉醇及其合并用药方案在临床上被越来越多的应用于乳腺癌、非小细胞肺癌、胰腺癌、软组织肉瘤、头颈癌、胃癌、卵巢癌以及前列腺癌等多种肿瘤的治疗。由于多西紫杉醇以t-丁氧羰基取代了紫杉醇中的苯甲酸基团，因而水溶性略大于紫杉醇。尽管多西紫杉醇的水溶性比紫杉醇稍好，但目前上市的多西紫杉醇注射液中仍应用Tween80和乙醇作为注射溶媒。市售制剂泰索帝(Taxotere)采用Tween80增溶、乙醇助溶，将其制成一个注射剂浓缩液和一个溶剂的两瓶装。其中注射剂浓缩液为含有主药的Tween80溶液，溶剂为13％(w／w)的注射乙醇，使用时先将溶剂加入浓缩液中混合均匀，临用前再用生理盐水或5％葡萄糖注射液稀释后使用。这种使用方法操作繁琐，临床用药极不方便，并且在配制过程中容易产生二次污染，给患者的使用带来风险。另外，虽然处方中使用了毒性相对较小的Tween80和乙醇作为溶剂体系，但在临床应用后仍出现了过敏反应，尽管发生率较紫杉醇注射剂低，但使用该药物时仍然需要对患者进行抗过敏前处理，防止过敏反应的发生。并且，Tween80还可能产生溶血反应。为了消除现有多西紫杉醇制剂所产生的一系列问题并解决多西紫杉醇溶解度低的缺点，本课题研制了多西紫杉醇静脉注射亚微乳，以期为多西紫杉醇的新剂型开发提供研究基础。本课题研究的主要内容包括：1．多西紫杉醇亚微乳的处方前研究。建立了多西紫杉醇亚微乳的HPLC含量测定方法，该方法灵敏、精密、便捷、专属性强，不仅适用于乳剂中药物含量的测定，而且可用于多西紫杉醇与其分解产物及其它杂质的分离测定。实验中还考察了各种外界因素对主药多西紫杉醇稳定性的影响。结果表明，碱性环境对多西紫杉醇影响最大，高温、氧化、光照条件次之，而酸性环境对药物的影响相对较小。2．多西紫杉醇亚微乳的处方设计及制备工艺研究。选取卵磷脂、泊洛沙姆188、油酸及油相的比例进行处方的单因素考察，研究其在不同浓度条件下对亚微乳相关性质的影响，并在此基础上以稳定性参数为评价指标，通过正交设计实验进一步对处方进行优化。在进行制备工艺的研究中，分别考察了乳化方法、乳化温度、乳化时间、均质压力及均质次数对乳化效果的影响，筛选出了最优的工艺条件。经过处方工艺优化后制备的多西紫杉醇亚微乳稳定性好，粒径分布均匀，50％乳滴的粒径在169nm以内。3．多西紫杉醇亚微乳的稳定性研究。考察了多西紫杉醇亚微乳在高温、冷冻、光照及低温条件下的稳定性，研究结果表明：高温、光照条件会使药物含量减小，pH值降低；冷冻条件下乳滴的粒径显著增大，并发生分层现象；而在低温条件下各项指标均无显著改变。另外，多西紫杉醇亚微乳在不同稀释液中的物理稳定性研究结果显示，各稀释液在5h内均未出现粒径显著增大的情况，说明该制剂经稀释后不会引起血管栓塞。4．多西紫杉醇亚微乳的药效学研究。采用移植法建立了荷瘤小鼠模型，通过监测肿瘤体积的变化、测定平均瘤重及抑瘤率、观察肿瘤组织的病理切片等方法，对多西紫杉醇亚微乳的抗肿瘤作用进行考察。实验结果表明：多西紫杉醇亚微乳治疗组荷瘤小鼠的肿瘤组织生长缓慢，瘤体积和重量的增长明显受到抑制；组织学观察结果也显示出瘤组织具有生长受抑、坏死明显等特点。5．多西紫杉醇亚微乳的体内药代动力学研究。建立了多西紫杉醇体内药物测定的HPLC法，选取炔诺酮为内标，以液—液萃取法处理血浆样品后进行测定。该法简单、快捷、灵敏度高，适合多西紫杉醇的体内分析研究。多西紫杉醇亚微乳在大鼠体内的药代动力研究结果显示，其AUC显著增加(p＜0.05)，清除率CL减小(p＜0.05)，表明多西紫杉醇亚微乳在体内可保持相对较高的血药浓度。6．多西紫杉醇亚微乳的初步安全性评价。通过异常毒性检查法、血管刺激性试验以及溶血性试验对多西紫杉醇亚微乳的安全性进行了初步评价。实验结果表明，多西紫杉醇亚微乳无明显静脉毒性，对兔耳静脉血管无明显不良刺激作用，体外无明显溶血作用。7．多西紫杉醇亚微乳的冻干研究。采用冷冻干燥技术将多西紫杉醇亚微乳制成冻干乳剂。通过考察冻干保护剂的类型、浓度及预冻的温度、速度对冻干乳相关性质的影响，对静脉注射用多西紫杉醇冻干乳的处方及制备工艺进行了初步的研究。研究结果表明，在考察的五种冻干保护剂中，海藻糖、蔗糖及麦芽糖的效果较好，其中尤以麦芽糖为最佳；进行预冻时，预冻的最低温度及速度对冻干产品有较大影响，预冻温度在-45℃、速冻时效果较好，冻干乳复溶后粒径变化相对较小。本课题中的有关内容《多西紫杉醇冻干乳及其制备方法》已申请了中国发明专利，目前正在审批中。