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目的:考察苏合香不同剂量防治大鼠心肌缺血作用强弱及其作用机制,为阐明苏合香“开窍醒神”表达“辛-心-开”性效科学内涵提供科学依据。方法:(1)采用心脏冠状动脉左前降支结扎法制备心肌缺血(MI)大鼠模型,记录各组大鼠给药前后的体温,以及大鼠从麻醉到苏醒的时间。(2)通过BL-420生物系统记录仪,观察并记录各组大鼠心电生理及血流动力的变化,探究苏合香对MI大鼠心功能的影响。(3)采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法,对MI模型大鼠缺血区心脏组织进行染色,观察心肌组织梗死面积,并计算心梗死率。(4)苏木精-伊红(HE)染色法,观察MI模型大鼠缺血区域组织细胞形态,并对其进行半定量评分比较。(5)采用比色法,检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB);微板法,检测乳酸脱氢酶(LDH)及谷草转氨酶(AST)的含量;硝酸还原酶法,测血清NO含量。(6)免疫组织化学法,测定MI大鼠模型心脏缺血区域心组织中磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、磷酸丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶(p-Akt)、丝氨酸/苏氨酸特异性蛋白激酶(T-Akt)蛋白的表达。(7)Tunel染色,观测MI大鼠缺血区心肌细胞凋亡情况。结果:(1)对模型大鼠体温和苏醒时间的影响:除苏合香0.167g/kg组于治疗给药第2d能显著升高模型大鼠体温外(P<0.05),其余时间点苏合香各组对模型大鼠的体温呈下降趋势(P>0.05);苏合香0.167g/kg、0.333g/kg组均可显著缩短麻醉模型大鼠的苏醒时间(P<0.01或P<0.05);苏合香0.667g/kg组对苏醒时间无显著性影响。(2)对模型大鼠心电生理的影响:苏合香0.167g/kg、0.333g/kg组预防给药能显著减缓大鼠缺血30min内的心率;苏合香0.333g/kg、0.667g/kg组防治给药,则显著加快MI大鼠的心率(P<0.01或P<0.05);苏合香3个剂量组均可不同程度抑制MI大鼠心电ST段下移、T波低平、QRS间期延长、Q波加深、S波变浅(P<0.01或P<0.05),防治药效与剂量呈负相关。(3)对模型大鼠左心室血流动力学的影响:苏合香0.167g/kg组可显著降MI大鼠的左心室收缩压和舒张压、左心室终末舒张压、左心室平均压(P<0.01或P<0.05);苏合香3个剂量组对MI大鼠左心室最大上升(或下降)速率均无显著性影响(P>0.05)。(4)对模型大鼠缺血区心肌组织形态的影响:TTC染色结果显示,造模后结扎处以下呈现明显的苍白梗死区,以结扎处及心尖处最为显著(P<0.01);苏合香0.167g/kg组能极显著降低模型大鼠心肌梗死率(P<0.01)。HE染色结果显示,造模后大鼠心脏组织出现明显病理学变化,表现为心肌细胞变性、坏死,苏合香3个剂量组可不同程度改善心组织的病理损伤(P<0.01或P<0.05)。(5)对模型大鼠血清相关酶活性的影响:苏合香0.167、0.333、0.667g/kg 3个剂量组均能显著降低模型大鼠血清中AST、CK-MB、LDH的含量(P<0.05或P<0.01),但对NO含量无显著性影响(P>0.05)。(6)对模型大鼠心肌组织PI3K相关蛋白的影响:苏合香还可显著降低MI大鼠心肌组织中PI3K、p-Akt、Akt的蛋白表达量(P<0.05或P<0.01),但对p-Akt、Akt蛋白的相互转化无显著性影响(P>0.05)。(7)Tunel染色的观测:结果显示,苏合香还可明显抑制MI大鼠心肌细胞的凋亡(P<0.05)。结论:苏合香能加快MI大鼠苏醒,改善MI大鼠心电生理及左心室收缩而提高心功能,降低心肌梗死率及心肌酶活性,减轻心肌细胞的病理损伤,从而发挥其“辛-心-开窍醒神”之性效。此外,苏合香抗心肌缺血机制可能与调控PI3K/Akt上游通路减缓心肌细胞凋亡相关。苏合香防治改善心肌缺血的结果综合提示:其作用强弱呈0.167g/kg>0.333g/kg>0.667g/kg趋势,为临床有效合理使用苏合香提供参考。