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目的：Celecoxib是唯一被美国食品与药品监督管理局批准用于家族性腺瘤性息肉病患者的药物，用于减少和抑制其大肠息肉生长。但是Celecoxib诱导肿瘤细胞凋亡的确切机制还没有完全搞清楚，Celecoxib抗癌的作用机理是否主要通过抑制COX-2的表达和PGE2的合成还存在争议，近来发现Celecoxib的抗癌作用是通过非COX-2途径的。本实验通过体内、体外实验探讨Celecoxib是否可通过β-catenin/survivin通路，诱导大肠癌细胞凋亡。
方法：
1、应用免疫组织化法检测60例直肠组织和20例癌旁正常粘膜组织中β-catenin和survivin的表达，并探讨两者的相关性。
2、应用化学合成的siRNA成功干涉β-catenin表达后，western blot检测survivin的变化。
3、应用western blot检测不同浓度的Celecoxib对大肠癌细胞系SW620中β-catenin和survivin表达的影响。
4、应用MTT、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和TUNEL检测不同浓度的Celecoxib对大肠癌细胞系SW620增殖和凋亡的影响。
5、建立人大肠癌SW620细胞裸鼠皮下移植瘤模型，随机分成对照组、Celecoxib 10mg/kg组、Celecoxib50mg/kg组。观察Celecoxib对裸鼠移植瘤生长的影响。
6、应用免疫组织化学法检测Celecoxib治疗对移植瘤内β-catenin、survivin表达的影响，并用TUNEL方法检测移植瘤内肿瘤细胞凋亡的变化。
结果：
1、在20例正常组织中β-catenin均呈正常表达，survivin均呈阴性表达。直肠癌中β-catenin的异常表达率为66.7％，survivin的阳性表达率为61.7％。β-catenin的异常表达与性别、年龄、直肠癌的分化程度、5年生存率无关(P>0.05)，与淋巴结转移显著相关(P<0.05)。survivin的表达与性别、年龄、直肠癌的分化程度、淋巴结转移无关(P>0.05)，与五年生存率显著相关(P<0.05)，β-catenin的异常表达与survivin的表达在直肠癌中有显著的正相关性(P<0.05，r=0.388)。 2、siRNA干涉β-catenin后，survivin的表达也随之下调。
3、Celecoxib可以抑制大肠癌细胞系SW620中β-catenin、survivin的表达，呈浓度依赖性效应。
4、MTT结果显示与对照组比较10<-5>mmol/L～10<-3>mmol/L范围内的吸光度(OD)值明显降低(P<0.05)，在这些浓度范围内，随着药物浓度增加，其OD值逐渐下降，而抑制细胞增殖的效果逐渐增加。
5、FCM检测发现60uM和80uM浓度的Celecoxib作用于SW620细胞24小时后，凋亡细胞的百分率分别为(4.2±0.67)％，(6.50±0.56)％。均显著高于对照组(P<0.05)。
6、与对照组相比Celccoxib能够抑制大肠癌移植瘤的生长(P<0.05)。免疫组化发现，Celecoxib作用于人大肠癌移植瘤后，Celecoxiblomg/kg、Celecoxib50mg/kg组β-catenin、survivin的平均灰度值明显高于对照组(P<0.05)，且随着药物剂量的增大，平均灰度值增加。TUNEL检测结果表明Celecoxiblomg/kg、Celecoxib50mg/kg组的凋亡指数明显高于对照组(P<0.05)，随着剂量的增加，其值越高。
结论：
1、β-catenin和survivin在大肠癌发生、发展中起着重要的作用。
2、β-catenin和survivin的表达正相关，β-catenin可以调节survivin的表达。
3、Celecoxib能够降低人大肠癌SW620细胞β-catenin和survivin的表达，诱导细胞凋亡。
4、Celecoxib能够明显抑制人大肠癌SW620细胞裸鼠皮下移植瘤的生长，降低移植瘤内β-caenin和survivin的表达，促进肿瘤细胞凋亡。
5、Celecoxib对人大肠癌的抗肿瘤效果可能与降低β-catenin的表达有关，进而引起survivin表达降低，促进细胞凋亡。