目的:通过检测对比先天性胆总管囊肿(Congenital choledochal cyst, CCC)不同部位囊壁组织与计划外怀孕中晚期终止妊娠胎儿胆管壁组织的神经生长因子(Nervous growth factor, NGF)及其受体(高亲和力受体TrkA和低亲和力受体P75NGFR)表达、神经细胞特异性烯醇化酶(Neurocyte specific enolase, NSE)与蛋白基因产物S-100 (Soluble protein 100, S-100)的表达,从胆管壁肠神经的发育与分布角度探讨其在CCC发病机制中的作用,丰富和完善CCC的发病机理;同时NSE与S-100的测定具有协同互补作用,可作为判断胆道神经发育状况的良好标记物。方法:随机选取2007年1月～2009年1月河北医科大学第二医院小儿外科收治的先天性胆总管囊肿患儿22例作为研究对象,男4例,女18例;年龄4.44±3.90岁(1个月～18岁)。其中以腹痛就诊者14例,以黄染白便就诊者6例,以发热呕吐就诊者1例,B超常规普查时发现1例。所有患儿术前均经B超或CT明确诊断,手术切除胆总管囊肿和胆囊,行肝门空肠Roux-Y吻合术,分别切取胆总管囊肿远端、近端的囊壁和胆囊壁作为实验组。选取计划外怀孕中晚期终止妊娠的胎儿11例,其中男5例,女6例,孕龄7.36±0.81月(6～8个月)。切取胎儿的胆囊壁和胆总管壁作为对照组。将两组所得标本分别以10%多聚甲醛固定、石蜡包埋,采用S-P法作石蜡切片免疫组化染色。ABC显色,细胞质中呈现棕黄色者为阳性,蓝色者为阴性,采用光学显微镜观察结果。多功能真彩色细胞图像分析管理系统分析处理,将阳性细胞数的表达按照0~1%=0、2~10%=1、11~50%=2、51~80%=3、81~100%=4分为五级(A);阳性细胞显色强度按照0(阴性)、1(弱阳性)、2(阳性)、3(强阳性)分为四级(B)。计算每五个视野下的阳性细胞个数(IHS =A×B)。对比分析CCC患儿胆囊、胆总管囊壁不同部位和胎儿的胆囊和胆管壁之间的肠神经发育各指标的表达情况。所得数据输入SPSS 13.0 for Windows软件进行数据分析,采用单因素的方差分析进行统计学处理。结果:光镜下观察NGF及其受体(TrkA和P75NGFR)、NSE和S-100的分布情况,发现所有上述指标在实验组和对照组的标本中均在胞质中有不同程度的表达。其中NGF、TrkA、P75NGFR和NSE在先天性胆总管囊肿远端的表达分别为0.73±0.15,0.82±0.13,0.91±0.13和0.73±0.12;在囊肿近端表达分别为1.50±0.18, 2.14±0.34, 1.50±0.25和1.50±0.25;在胎儿胆总管的表达分别为2.64±0.49, 3.82±0.50, 2.27±0.52和2.36±0.56。可以看出上述因子在先天性胆总管囊肿远端的表达弱于在囊肿近端的表达(P﹤0.05),有显著性差异。而在先天性胆总管囊肿的远端、近端的表达又均弱于在胎儿期胆总管的表达,三者之间有明显统计学差异(P﹤0.05);S-100在先天性胆总管囊肿的远端、近端和胎儿期胆总管表达分别为1.00±0.11,1.59±0.20和2.73±0.38。S-100在先天性胆总管囊肿的远端、近端的表达也均弱于在胎儿期胆总管的表达(P﹤0.05),有统计学差异,但是在先天性胆总管囊肿远端和近端的表达没有差别(P﹥0.05),无统计学差异。上述指标在实验组和对照组胆囊标本的表达无明显统计学差异(P﹥0.05)。结论:1.依据NGF、TrkA、P75NGFR在CCC的远端及近端表达均弱于在胎儿胆总管的表达,认为神经生长因子及其受体在CCC的发病中起到重要作用,肠神经发育不良可能是其发病的重要原因之一。2.NGF、TrkA、P75NGFR在CCC远端的表达弱于囊肿近端的表达,说明囊肿远端是病变之所在,上述指标在囊肿远端的发育受限,进一步导致胆总管的扩张。3.NGF、TrkA、P75NGFR在CCC近端的表达弱于在胎儿胆总管的表达,推测可能是由于胆总管的扩张,导致上述指标的密度减低或者是囊肿的近端肠神经发育受限较轻所致,有待于进一步证实。4.NGF、TrkA、P75NGFR在影响CCC发病的同时,未影响到胆囊的发育。5.NSE和S-100是胆道肠神经发育成熟的标志,二者在CCC近端、远端的表达均弱于胎儿胆总管的表达,表明肠神经的发育成熟和分布在CCC患者受到限制。