金刚藤中薯蓣皂苷元含量的HPLC测定及提取工艺的改进

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金刚藤为百合科菝葜属植物菝葜的干燥根茎,临床主要用于治疗各种炎症性疾病,如妇科盆腔炎等,治疗效果较好,市场应用前景广阔。然而金刚藤制剂到目前尚未建立较理想的定量分析方法; 另一方面,由传统水提醇沉工艺研制的制剂服用量大,特别是提取过程中会消耗大量有机溶剂,成本高且污染环境。为此,本文建立了金刚藤中薯蓣皂苷元含量测定的HPLC 法,探讨了超滤膜分离技术纯化金刚藤水提液的实验条件,并将超滤法与醇沉法作对比。主要研究结果如下: 1. 建立了金刚藤中薯蓣皂苷元含量测定的HPLC 法,同时确定了金刚藤生药材和浸膏的最佳水解条件。生药材的最佳水解条件是:在39℃恒温箱中发酵72 h,加硫酸至5%,90℃水浴中常压水解6 h。在其色谱条件下,薯蓣皂苷元保留时间为10 min左右,且主峰与相邻峰分离度大于2,达到了色谱分离的要求,精密度、重现性及回收率均较好。浸膏的最佳水解条件是以3%硫酸在90℃水浴中常压水解5 h。在其色谱条件下,薯蓣皂苷元保留时间为12 min 左右,主峰与相邻峰也能得到较好的分离, 精密度和重现性也较好,最低检测限为117.8 ng。进样前样品以中性氧化铝脱色处理,效果较好。2. 研究了超滤膜分离技术澄清金刚藤水提液时各实验条件的影响,初步探讨了膜清洗情况。试验结果表明: 药液先以微孔滤膜过滤更有利于超滤的进行; 切割相对分子质量为60000 的超滤膜最为理想、超滤时操作压力不宜超过0.20 MPa、料液温度应控制在40℃、料液浓度为0.2 g·mL-1。通过以0.05 mol·L-1硫酸和0.05 mol·L-1氢氧化钠溶液对污染膜交替清洗,膜通量能恢复为原来的72.80%。3. 对比研究了超滤法和醇沉法对金刚藤水提液的纯化效果。通过比较浸膏得率及降低率、薯蓣皂苷元回收率及单位浸膏的薯蓣皂苷元得率,认为70%乙醇较超滤及其他各浓度醇沉法澄清效果好,但超滤法能最大限度的保留薯蓣皂苷元的回收率,且操作简单、节省溶剂、保护环境。
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