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目的:检测重症肌无力患者病程中不同时期（未经治疗首诊期、治疗后缓解期）外周血中Tfh细胞及单核细胞表面可诱导共刺激分子（ICOS）及其配体ICOSL和程序性凋亡因子-1（PD-1）及其配体PD-L1的表达情况,及血清中相应可溶性分子表达情况,探讨Tfh细胞及共刺激分子的在MG患者不同疾病阶段的免疫病理作用。方法:收集自2016年05月至2017年10月间就诊于苏州大学附属第一医院门急诊或住院的初诊期且未接受过治疗的重症肌无力病人（Untreated stage myasthenia gravis,USMG组）72例,经过治疗后病情稳定期患者（Remission stage myasthenia gravis,RSMG组）29例,同期选取非MG的自身免疫性疾病患者（The autoimmune disease of non-myasthenia gravis,NMG组）22例,脑血管病患者（Cerrbrovascular disease,CVD组）29例,健康人（Health,HC组）25例,分别留取各实验对象外周血全血、血清标本以及临床信息。2、利用免疫荧光标记、流式细胞术检测各实验对象外周血中CD4+T细胞表面ICOS、PD-1的表达及CD14+单核细胞、CD19+B淋巴细胞表面ICOSL、PD-L1的表达,及CD4+ICOS+PD-1+CXCR5+T细胞的比例,同时收集上述5组外周血血浆,用ELISA法检测细胞因子IL-4、IL-21及可溶性ICOS/ICOSL和PD-1/PD-L1的表达量并进行统计学分析。结果:1、各实验组外周血中IL-4含量未见明显差异,P>0.05。2、USMG组患者外周血中CD4+ICOS+PD-1+表达率[19.53（9.25,27.06）]%较RSMG组[13.3（6.40,17.49）]%升高,P=0.003,且较CVD组、HC组升高,P=0.001、0.000,其中全身型MG组[23.24（15.29,31.77）]%较眼肌型MG组[10.38（6.70,20.03）]%表达明显升高,P=0.000;胸腺瘤组[32.03（14.61,35.01）]%较非胸腺瘤组[17.96（7.92,23.44）]%升高,P=0.005;早发型[9.44（5.25,22.39）]与晚发型[20.73（11.06,28.12）]有统计学意义,P=0.016,在性别分组间无明显统计学差异,P>0.05。3、USMG组患者外周血中CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+表达率[12.54（7.62,19.48）]%较RSMG组[6.39（4.21,8.57）]%升高,P=0.000,且较CVD组、HC组明显升高,P=0.000、0.000,其中全身型MG组[12.54（7.62,19.48）]%较眼肌型MG组[11.05（5.97,15.44）]%表达升高,P=0.022;胸腺瘤组[23.20（10.66,27.47）]%较非胸腺瘤组[11.85（7.60,14.62）]%明显升高,P=0.002,在性别分组、年龄分组间未见明显差异,P=0.959、0.414;全身型MG组患者外周血中CD4+CXCR5+ICOS+PD-1+表达率与MG病人病情的严重度QMG评分呈明显正相关性（r=0.318）。各实验组外周血中细胞因子IL-21的表达,USMG组（390.5±53.90）ng/ml与RSMG组（106.7±8.08）ng/ml、CVD组（138.0±17.87）ng/ml、HC组（135.5±7.76）ng/ml表达有统计学差异,P均<0.001;其中全身型MG组（579.0±46.68）ng/ml与眼肌型MG组（224.8±64.70）ng/ml有统计学差异,P=0.0002,胸腺瘤组（717.7±25.02）ng/ml与非胸腺瘤组（390.5±53.90）ng/ml比较有统计学意义,P=0.035,在性别分组、年龄分组间比较无统计学意义,P=0.755、0.442。4、USMG组患者外周血中CD4+T细胞表面ICOS+细胞亚群表达率[50.39（25.99,58.75）]%及CD14+单核细胞[55.12（40.74,61.46）]%、CD19+B淋巴细胞表面ICOSL表达率[49.99（21.53,63.98）]%较RSMG组升高,P=0.025、0.008、0.010,且较CVD和HC组升高,P均<0.05,MG各亚型之间,全身型MG组外周血中CD4+ICOS+T细胞表达率、CD19+ICOSL+B细胞表达率[55.13（35.48,61.13）]%、[57.14（42.04,64.69）]%较OMG组[31.05（17.50,55.95）]%、[34.75（20.19,53.48）]%增高,P=0.002、0.006,胸腺瘤组[55.95（47.37,65.90）]%、[64.10（43.70,69.46）]%较非胸腺瘤组[46.90（22.40,57.79）]%、[47.30（20.70,57.90）]%增高,P=0.025、0.002,在年龄、性别分组间无明显统计学差异,P均>0.05,ICOSL在CD14+单核细胞表面的表达胸腺瘤组[57.80（55.57,72.97）]%与非胸腺瘤组[50.08（35.90,60.49）]%间有统计学意义,P=0.005;USMG患者外周血中s ICOSL表达（12.19±0.79）ng/ml较RSMG组（6.40±0.27）ng/ml、CVD组（2.76±0.55）ng/ml、HC组（3.00±0.30）ng/ml各对照组升高,P均<0.0001,其中全身型MG组（15.40±1.33）ng/ml较眼肌型MG组（10.44±1.06）ng/ml升高,胸腺瘤组（23.02±1.95）ng/ml与非胸腺瘤组（12.19±0.79）ng/ml,P均<0.05,MG组患者外周血中s ICOS的表达与各实验组间未见明显差异,P均>0.05。5、USMG组患者外周血中CD4+T细胞表面PD-1+细胞亚群表达率[37.80（31.87,49.28）]%及CD14+单核细胞[60.42（46.15,66.97）]%、CD19+B淋巴细胞表面PD-L1表达率[41.05（21.42,57.12）]%较RSMG组升高,P=0.033、0.000、0.000,且较CVD和HC组升高,P均<0.05,MG各亚型之间,CD4+T细胞表面PD-1+的表达,全身型MG组[42.89（32.26,52.21）]%与OMG组[33.68（31.10,39.57）]%、胸腺瘤组[49.30（42.80,55.84）]%与非胸腺瘤组[36.30（31.60,43.70）]%、早发型[32.40（28.70,42.30）]%与晚发型[39.91（32.40,50.52）]%之间有统计学意义,P=0.027、0.005、0.009,在性别分组间无明显统计学差异,P>0.05;PD-L1在CD19+B淋巴细胞表面的表达,全身型[49.26（27.53,60.55）]%与眼肌型[33.26（21.33,45.83）]%、胸腺瘤组[54.79（39.67,62.24）]%与非胸腺瘤组[34.67（21.33,54.33）]%之间有统计学意义,P=0.025、0.002,在年龄、性别分组间无明显统计学差异,P均>0.05;PD-L1在CD14+单核细胞表面的表达,胸腺组[63.80（44.05,70.51）]%与非胸腺瘤组[60.40（46.10,65.02）]%之间有统计学意义,P=0.005,在临床分型、年龄、性别分组间无明显统计学差异,P均>0.05;USMG患者外周血中s PD-1表达（54.35±6.00）ng/ml较RSMG组（22.91±2.12）ng/ml、CVD组（23.84±3.12）ng/ml、HC组（26.85±2.76）ng/ml,P均<0.001,其中全身型MG组（63.32±7.18）ng/ml较眼肌型MG组（28.73±2.30）ng/ml升高,P=0.0015,在是否胸腺瘤组、年龄、性别分组间未见明显差异,P均>0.05。USMG患者外周血中s PD-L1表达（15.35±1.04）ng/ml较RSMG组（7.00±0.35）ng/ml、CVD组（5.76±1.18）ng/ml、HC组（4.71±0.57）ng/ml升高,P均<0.0001,其中全身型MG组（18.55±1.00）ng/ml与眼肌型MG组（13.42±1.34）ng/ml、胸腺瘤组（16.17±1.07）ng/ml与非胸腺瘤组（9.55±0.28）ng/ml有统计学意义,P=0.014、0.032,在年龄、性别分组间未见明显差异,P均>0.05,且在全身型MG患者外周血中,s PD-1的表达均数较s PD-L1升高6倍左右。结论:Tfh细胞及共刺激分子ICOS/ICOSL及PD-1/PD-L1通路在MG病理过程中发挥了作用,是免疫调节的一个重要途径,Tfh和ICOS/ICOSL及PD-1/PD-L1可能是监测MG免疫病理变化、具有潜在临床应用价值的生物学标志。