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目的:本实验是以《金匮要略·腹满寒疝宿食病脉证第十》中的赤丸方为基础、参考现代药理研究结论、结合导师临床体会、从动物实验入手,观察、研究赤丸方中的药物,在经过60min的煎煮减毒处理后,是否仍会对Wister大鼠的肾脏产生慢性毒性以及其慢性毒性的程度;采集可靠的实验依据、提供可靠的实验结果,为临床选方用药提供参考,并为进一步揭示其肾脏毒性机制、避免其肾脏毒性反应打下基础。 方法:清洁级纯系Wister大鼠80只,体重200±10克,雌雄各半,分别用随机区组法分为4组(空白对照组、高剂量组、中剂量组、低剂量组),每组20只,雌雄各半;给各组大鼠称量体重并对体重值做统计学处理,在统计学结果显示各组大鼠体重的差值无统计学意义后,将各组大鼠按各自组别适应性喂养一周;适应性喂养结束后再次称量大鼠体重、计算各组大鼠一周的体重变化值,并分别作统计学处理;在统计结果仍无显著性差异的情况下,用剪尾采血法剪尾,采集各组大鼠的血液送检其血液一般情况。于第二周开始,依据给药标准、根据大鼠体重、按照赤丸方中各药的比例称取各药物;以水为溶剂、按照重浸提法的要求提取所称量药物的成份,用700W的额定功率对浸渍液进行60min的煮沸减毒处理[事先测定该加热功率下60min的蒸发量,准确控制溶剂容量以保证加热60min后所得溶液的浓度恰为200％(2g生药/ml)];用煎煮所得的汤剂,按照等浓度不等容积的方法,以拟临床用量60、30、10倍的药量,分别给高、中、低剂量组大鼠按相应剂量灌胃给药并观察其灌胃后反应(空白组用凉开水);每天定时灌胃1次,每周连续灌胃6次、测量体重1次、并随体重变化调整给药量,持续灌胃3个月;在末次灌胃结束24h后再次测量各组大鼠体重变化,用剪尾采血法采集各大鼠的血液标本送检其血液学一般情况;用心脏采血法,采集各组半数大鼠的血液标本送检其与肾功能相关的生化指标;剖取大鼠肾脏组织、制作组织标本,在光镜下观察其肾脏组织形态学的改变。各组剩余大鼠继续喂养3周,为观察其可逆性情况和可能存在的迟发性毒性反应做准备;对各标本的相关指标值进行统计分析。 结果:1.实验药物对各组大鼠体重增长所造成的影响有统计学意义:与空白组组相比:高剂量组体重表现出显著性差异(P<0.01);与高剂量组体重变化相比:各组体重均有统计学意义(P<0.01,P<0.05,P<0.01);与中剂量组体重相比:高剂量组体重有统计学意义(P<0.05);与低剂量体重相比:高剂量组体重有统计学意义(P<0.01);2.实验药物对各组大鼠的血红蛋白含量所造成的影响无统计学意义(P>0.05);3.实验药物对各组大鼠的红细胞数值所造成的影响无统计学意义(P>0.05);4.实验药物对各组大鼠的肾功能所造成的影响为:1)对尿素氮排泄的影响无统计学意义(P>0.05);2)对肌酐排泄的影响无统计学意义(P>0.05);3)对尿酸排泄的影响无统计学意义(P>0.05);4.对各组大鼠肾脏的组织形态学未造成异常影响;5.不存在迟发性的肾脏毒性反应。 结论:将赤丸方中各味药物的水浸渍液进行60min的煎煮减毒处理后所制成的浓度为200%(2g生药/ml)的汤剂,以最大用量为拟临床用量60倍的药量给Wister大鼠持续灌胃3个月,对大鼠的体重增长产生了显著性影响(表现为与空白组相比:低剂量组大鼠的体重增长幅度未见减缓,中剂量组略有减缓,高剂量组的减缓幅度较中剂量组更为明显),未对大鼠的红细胞数目和血红蛋白数量产生显著性影响,未对大鼠的肾脏功能和肾脏组织形态学产生显著性毒性。