【摘 要】
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目的观察MSC(间充质干细胞)复合PRP(富血小板血浆)-羟基磷灰石支架修复股骨缺损的效果。方法选取大鼠30只雌雄不限体重约220-280g,从中随机选取18只大鼠,随机分成3组,每6只为一组。分别标记为MSC复合PRP-羟基磷灰石支架组(A组实验组),MSC复合羟基磷灰石支架组(B组单纯支架组),空白组(C组)。制备大鼠左侧股骨中段一蝶形骨片缺损并离断对侧剩余股骨模型,A组缺损处填充BMSC复合
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目的观察MSC(间充质干细胞)复合PRP(富血小板血浆)-羟基磷灰石支架修复股骨缺损的效果。方法选取大鼠30只雌雄不限体重约220-280g,从中随机选取18只大鼠,随机分成3组,每6只为一组。分别标记为MSC复合PRP-羟基磷灰石支架组(A组实验组),MSC复合羟基磷灰石支架组(B组单纯支架组),空白组(C组)。制备大鼠左侧股骨中段一蝶形骨片缺损并离断对侧剩余股骨模型,A组缺损处填充BMSC复合PRP-羟基磷灰石,B组填充MSC复合羟基磷灰石支架。C组不填充任何物质。选取2只大鼠制备BMSC培养,传至3代用于实验,其余另选9只大鼠心脏取血制备PRP以及备用。于造模后4,8,12周分观察形态学及影像学检查,再处死实验动物,取股骨标本行体外观察并行组织学观察。计算缺损区域新生骨小梁面积,比较各组骨缺损的修复情况,并用统计学计算。结果(1)形态学观察:4周时形态学观察A、B、C三组患侧均无明显肢体外展及外旋,患肢无法负重。8周时可见A、B两组患肢未见明显短缩及外旋或内旋。A组行走步态趋于正常,患侧肢体见部分负重。B组可见行走较4周时改善趋于正常,但是患侧前后爪间距较检测稍有缩短,患肢部分负重。C组患肢出现不同短缩现象。12周时:A组及B组患侧肢体可以完全负重,同时行走时可见前后步距同健侧。C组:可见患侧肢体形成不同程度的短缩、并且伴有外旋畸形,并且骨缺损部位可见形成假关节。(2)标本大体观察:4周时:A组骨缺损处存在大量纤维结缔组织,同支架紧密相连,B组存在纤维组织形成,但同支架相连未有A组紧密,C组可见。8周时:可见A、B两组骨缺损处的支架均被纤维结缔组织包裹,并且同骨折断端紧密相连,但A组支架较B组支架减少明显,提示A组支架骨化程度较B组高。C组未见骨折断端存在骨性相连,骨折断端处可见纤维组织包裹。12周时:A组骨缺损处可见骨皮质连续,在骨折断端两侧存在多余骨痂,缺损处的骨皮质未见支架。双侧断端存在为正在塑性的增生骨痂,提示愈合进入骨加塑性期。B组见骨缺损处骨皮质大部分连续,在缺损处新生的骨皮质上仅存在少部分支架残留。C组未见骨皮质形成,断端两侧被机化的纤维组织包裹,骨髓腔封闭,双侧骨折断端未见连续。(3)影像学观察:4、8、12周时A组骨痂量及骨缺损修复均优于B组,C组未见明显修复现象出现。(4)组织学观察:4、8、12周取标本行HE染色,4周时:A组新生骨小梁面积较B组大,A组及B组新生成骨小梁面积均比C组多,差异具有统计学意义(P<0.05)。8周时:A组新骨小梁面积同B组相比,统计学差异明显(p<0.05),提示:A组新生骨小梁面积大于B组、复合支架组愈合明显比单纯支同架组快。C组样见大量纤维组织形成,仅存在部分新生骨小梁。12周时:A组可见骨髓腔形成,大量骨小梁彼此相连有序的排列,同时可见大量的成骨细胞,缺损区域板层骨形成。B组见大量的骨小梁,但排列欠有序,成骨细胞较A组少。C组可见部分骨形成,骨小梁稀疏,缺损部位由大量纤维结缔组织替代。结论BMSC联合PRP-羟基磷灰石支架对骨缺损的修复存在良好的修复作用,且无免疫原性,促进新骨生成速度快。
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