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目的:探讨血清人博卡病毒(human bocavirus,HBoV)抗体以及痰液、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluids,BALF)、血清HBoV DNA检测在儿童急性下呼吸道HBoV感染诊断中的应用价值。方法:选择2013年1至4月苏州大学附属儿童医院呼吸科收治的714例急性下呼吸道感染(acute lower respiratory tract Infection,ALRI)患儿为研究对象,采集患儿血清、痰液及BALF,用ELISA法检测血清中HBoV特异性IgG、IgM抗体,实时荧光定量PCR法检测痰液、BALF及血清中HBoV DNA。以血清和(或)BALF HBoVDNA检测结果作为评价标准,将痰液HBoV DNA、血清HBoV抗体以及二者结合后共三项指标分别与评价标准比较,评价其一致性及优劣性,并计算3项检测结果灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、J指数等各项诊断评价指标。分析血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA与血清和(或)BALF HBoV DNA在各年龄组的检出情况。分析痰液HBoV DNA、血清HBoV抗体、血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA以及血清和(或)BALF HBoV DNA阳性患儿混合感染情况。结果:(1)714例患儿HBoV各项检测阳性率分别为:血清HBoV抗体13.2%(94/714)、痰液HBoV DNA14.3%(102/714),BALF HBoV DNA7.3%(7/96),血清HBoV DNA6.0%(43/714),四项检测HBoV总阳性检出率21.6%(154/714)。(2)痰液HBoV DNA与血清和(或)BALF HBoV DNA检测结果具有一致性,差异有统计学意义((χ2=91.834,P<0.001)。痰液HBoV DNA高载量患儿中血清和(或)BALF HBoV DNA阳性率明显高于低载量患儿,差异有统计学意义(χ2=29.646,P<0.001)。血清HBoV抗体及血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA检测与血清和(或)BALF HBoV DNA检测均具有高度一致性(χ2=91.834、124.662、138.643,P均<0.001);(3)痰液HBoV DNA、血清HBoV抗体、血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA的检出率均优于血清和(或)BALF HBoV DNA检测(χ2=23.547、33.440、12.410,P均<0.001)。(4)痰液HBoV DNA、血清HBoV抗体、血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA结果的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、符合率、J指数分别为:血清HBoV抗体:58.3%、90.1%、29.8%、96.8%、88.0%、0.484(Kappa=0.335,P<0.001);痰液HBoV DNA:68.8%、89.6%、32.4%、97.5%、88.2%、0.584(Kappa=0.384,P<0.001);血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA:70.4%、94.8%、38.0%、98.6%、93.7%、0.652(Kappa=0.463, P<0.001)。(5)血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA与血清和(或)BALF DNA的检测结果均提示,3岁以下患儿的HBoV检出率较高,尤以~1岁组最高,且同一年龄组两项检测HBoV检出率差异均无统计学意义(P均>0.05)。但两项检测在各年龄组的检出率差异均有统计学意义(χ2=58.303、35.053,P均<0.05),两者均以~1岁组最高,其次为~3岁组,血清HBoV抗体+痰液HBoVDNA以>3岁组最低,血清和(或)BALF DNA以~6个月组最低。(6)痰液HBoVDNA阳性患儿混合其他病原检出率高于血清HBoV抗体阳性、血清和(或)BALFHBoV DNA阳性患儿的混合感染检出率(χ2=9.138,10.036,P均<0.05)。血清HBoV抗体+痰液HBoV DNA阳性患儿与血清和(或)BALF HBoV DNA阳性患儿相比,总混合检出率及单独各类病原的混合检出率均无统计学差异(χ2=0.102,1.965,1.022,0.022,P均>0.05)。结论:血清和BALF HBoV DNA检测是诊断HBoV感染的极佳指标,并可以提高HBoV的检出率。痰液高载量HBoV与下呼吸道感染的关系密切。作为血清学依据的HBoV抗体检测具有一定的应用价值,与传统的痰液DNA检测结合,可以有效提高儿童急性下呼吸道HBoV感染的诊断效力,并反映HBoV感染的年龄分布及混合感染情况。