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黄曲霉毒素B1是目前发现毒性最强、致癌性最高的化学物质之一,主要是由黄曲霉和寄生曲霉寄生产生的的代谢产物,理化性质稳定,易于污染,在农产品、蔬菜、加工食品、饲料等中常被检测出。黄曲霉入侵到食物链中,将产生对应的黄曲霉毒素,人体或动物一旦食用将对机体产生巨大的危害。目前,世界各国对农产品、食品、饲料等中黄曲霉毒素B1含量都有严格的限制。避免黄曲霉毒素在食物链中的污染,不仅仅是在农产品原料方面的防控,在农产品材料贮藏、食品加工、物流流通环节更要进行检测监督。我国对黄曲霉毒素B1检测技术的研究工作进行了许多年,形成的检测技术手段分为三大类,国际上权威的检测方法是利用精密仪器-高效液相法进行检测,我国也执行此项检测法,但该方法设备成本较高、不利于操作,样品的前处理繁琐,检测流程整体时间较长,不利于监测部门对市场的动态监督。间接竞争ELISA方法是利用抗原抗体相互结合,酶标二抗加入后与底物反应显色以确定检测物含量的实验技术,该实验技术转化为试剂盒产品将形成具有对样品的前处理要求低,便于操作,而且能大大缩短检测时间的可推广化产品。本项目研制的间接竞争ELISA试剂盒,通过条件的优化,确定了所需的包被抗原最佳加入量为50ng/孔,黄曲霉毒素B1单克隆抗体加入量为100ng/孔,二抗稀释比例为1：500最合适；所研制的间接竞争ELISA试剂盒检测结果较高效液相法(HPLC)对比符合率大于98%,检测结果与国际认可方法一致；试剂盒的准确度研究采取了检测大米、玉米、花生中黄曲霉毒素B1的检测,结果显示大米检测回收率为：85%-91%,玉米检测回收率为：84%-94%,花生检测回收率为：88%-92%,回收率均符合国家标准回收率80%-120%范围,说明了研制的试剂盒检测结果的准确度高；试剂盒灵敏度研究,进行了对大米、玉米、花生的检测限分析,结果显示出该试剂盒对大米的检出限为：0.25μg/kg,玉米的检出限为：0.30μg/kg,花生的检出限为：0.30μg/kg,说明了该试剂盒的检测限灵敏且比国家标准检出限更低更；试剂盒精密的研究,采取了监测大米的ELISA检测板,结果显示板内差异3.0%、2.7%、3.2%,板间差异2.9%,说明研制的试剂盒批内与批间的差异不大,检测方法稳定,检测结果不受研制试剂盒批次的影响。