电离辐射诱发孕鼠体内旁效应的初步研究

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目的:初步探讨γ射线对旁效应器官胎鼠脑组织的影响及机制。方法:将怀孕的昆明小鼠随机分为7组:空白对照组、0.5 Gy全身照射组、0.5 Gy头部照射组、1.0 Gy全身照射组、1.0 Gy头部照射组、2.0 Gy全身照射组及2.0 Gy头部照射组。照射组用60Co治疗机对实验小鼠于孕9 d单次急性垂直照射,于孕18 d剖腹取胎鼠,观察胎鼠状态,记录胎鼠个数、大小,及有无死胎、畸胎及流产等,取活胎快速断脑取脑组织。用western-blot方法检测胎鼠脑组织中MeCP2蛋白含量变化,酶联免疫吸附法(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)测定AchE及Ach的含量,NO试剂盒和SOD试剂盒分别测定NO含量和SOD活性。运用统计描述的方法统计孕鼠一般状况及胎鼠情况,其它数据用SAS8.0统计软件进行处理分析。结果:1.与空白对照组比较,电离辐射照射孕鼠头部后,随着剂量的增加,胎鼠死胎率、畸胎率以及出现胎鼠死胎、畸胎、流产的孕鼠数呈上升趋势,与全身直接受照后胎鼠、孕鼠的变化无显著差异。2. Western-blot检测,得到了分子量约为84KD蛋白条带。与空白对照组比较,0.5Gy头部照射组,1.0 Gy头部照射组和2.0 Gy头部照射组MeCP2表达量均明显降低,1.0 Gy全身照射组和2.0 Gy全身照射组MeCP2表达量亦明显降低,1.0 Gy和2.0 Gy组之间无明显差异。3.孕鼠早期受到电离辐射后,与空白对照组相比,随着剂量增加,Ach和AchE含量整体呈下降趋势,其中0.5 Gy头部照射组、1.0 Gy头部照射组及2.0 Gy头部照射组小鼠胎脑Ach含量均明显降低(p<0.05);且0.5 Gy头部照射组较0.5 Gy全身照射组胎脑Ach含量显著性降低(p<0.05);另外2.0 Gy头部照射组胎脑AchE含量显著性降低(p<0.05);2.0 Gy全身照射组小鼠胎脑Ach含量和AchE含量明显降低(p<0.05)。4.γ射线照射后,各剂量组小鼠胚胎脑组织匀浆中NO含量呈增加趋势,SOD呈下降趋势。与空白对照组相比,2.0Gy头部照射组胎脑组织匀浆中NO含量明显增加(P<0.05),SOD活力显著下降(P<0.05);同时1.0Gy头部照射组较1.0Gy全身照射组SOD活力高(P<0.05);且1.0Gy头部照射组较1.0Gy全身照射组NO含量低(P<0.05);2.0Gy头部照射组较2.0Gy全身照射组NO含量明显增加(P<0.05);1.0Gy全身照射组、2.0Gy全身照射组NO含量均明显增加(P<0.05), SOD活力均显著下降(P<0.05)。结论:1.证实电离辐射能够诱发体内旁效应。2.γ射线照射孕鼠头部后,胎鼠脑组织表现的体内旁效应与孕鼠全身直接受照后胎鼠脑组织出现的损伤效应类似,在一定范围内与剂量呈正相关。3.孕鼠孕9d时头部受照,随着γ射线剂量增加,死胎率、畸胎率和流产率呈增加趋势。4.孕鼠头部受照后,诱发胎鼠脑组织MeCP2表达量改变,促使DNA去甲基化,引起基因表达改变,可能促使发生癌症等随机性效应的概率增加。5.孕鼠头部受照后,影响胎鼠脑组织神经发育,可能与低剂量电离辐射刺激胎脑神经生长发育,较高剂量抑制胎脑神经生长发育有关,有待进一步研究。6.孕鼠早期头部受照后,产生大量的NO自由基,SOD活力下降,致使胚胎脑组织损伤。NO增加及SOD活力下降是否为体内旁效应机制之一尚需进一步论证。
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