饭豆根瘤菌和AMF与饭豆的互作及标记根瘤菌释放安全性研究

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将从饭豆(Vigna umbellate L.)分离的不同代时的饭豆根瘤菌(Rhizobium sp.CYY3302,Rhizobium sp HCY9101,Rhizobium sp JMCl402)与AMF(Arbuscular Mycorrhizal Fungi,丛枝状菌根真菌)共同接种于饭豆,进行饭豆、玉米田间小区间作试验。统计结瘤数,用曲利苯蓝(Trypan Blue,TB)做植物根染色以检测菌根侵染率,并对生物产量进行统计分析。结果表明:接种饭豆根瘤菌和AMF的处理与未接种的处理相比,饭豆的结瘤率比对照提高52~134%;饭豆及玉米的菌根感染率比对照分别增加43.1~80%和46.8~97.6%;饭豆植株的产量提高了54~67%,而玉米的产量提高了2.4~19.5%。研究结果还表明:豆科作物接种根瘤菌,即使在种过豆科植物的老区,也是有效的。 饭豆根瘤菌JMC1402P(带gfp-gusA标记基因)在饭豆根表的定殖研究表明:饭豆根瘤菌在饭豆根表的定殖动态随环境条件变化,在琼脂管中,饭豆根尖在早期对JMC1402P有较强的吸引作用;而在灭菌土中,根尖定殖密度没有整体根段高:在未灭菌土中,JMC1402P的定殖受土壤理化因子和土著性微生物竞争的影响。 JMC1402P标记菌株释放环境的安全性研究表明,当JMC1402P与华癸中生根瘤菌(Rhizobium huakuii)JS5A16L(带luxAB标记基因)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluoFescens)Pf.X16L2(带luxAB标记基因)混合培养在微孔滤膜上、灭菌盆装土及田间三个环境中时,未检测到华癸中生根瘤菌JS5A16L和荧光假单胞菌Pf.X16L2中有gfp基因编码的绿色荧光蛋白的存在,在X-GlucA作用下亦没有带有gusA基因的发光菌落。结果表明,JMC1402P用于田间生态学研究是安全的。
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