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前言 惰性气体全氟乙烷(perfluoroethane C2F6)是一种长效气体,用于视网膜脱离的治疗,已有二十余年的历史。随着显微手术的发展,C2F6作为玻璃体替代物越来越被临床医生所认识。化脓性眼内炎具有病势凶险,眼内组织损伤重,预后不良等特点。其治疗包括两个方面:(1)通过各种给药途径使用抗生素和糖皮质激素;(2)手术治疗,即玻璃体切割术;(3)玻璃体切割联合玻璃体腔内注射药物。 本实验通过化脓性眼内炎动物模型采用玻璃体细菌培养、视网膜病理切片组织光镜检查,观察惰性气体C2F6对化脓性眼内炎的作用。 实验材料 1.实验动物:标准实验用大耳白兔30只,雌雄不限。无任何眼疾,明室、笼养,符合国家医用动物使用标准。 2.实验器材:倒置显微镜、石蜡切片机等。 3.实验药品:惰性气体C2F6、速眠新、庆大霉素等。 实验方法 1.动物模型的制作:在兔角膜缘后1.5mm垂直巩膜向玻璃体腔内注入经培养计数的金黄色葡萄球菌30刁0个0刀sin。接种10叫 小时后,瞳孔区有脓性渗出物或玻璃体中度混浊,影响视盘周围静脉分支的观察,表明化脓性眼内炎模型制作成功。2分组:将动物眼编号后随机分为四组。第一组向玻璃体腔注射庆大霉素 0.Zing( 0只眼):第二组向玻璃体腔注射 C开60.5ml(2只眼儿第三组向玻璃体腔注射庆大霉素 0.Zm++CJ60.sml*3只眼);第四组向玻璃体腔注射消毒空气0.sml6只眼)。3.标术采集的时间及方法;术后每日行裂隙灯检眼镜及NCT检合,0.3%氧氟沙星眼药水每日三次点眼,0二%阿托品眼药水每[;l一次点眼。对于眼压高于 23mmHg门.IKpa)者于全麻厂放”乙,使其眼压保持在 2.61土 0.SKpa范围内。在治疗前 7大及治疗后每7大于全麻下抽取实验眼玻璃体0* 进行细菌培养。在治疗后第 7大、第 14天、第 ZI大、第 28天分别将细菌培养阴性的动物处死,第四组也在相同时问内处死,摘除眼球,常规制作标本。4.细菌培养方法:将抽取的玻璃体在无菌操作台涂于琼脂培养基_上,但温箱内培养24小时观察细菌是否生长,如果有细菌生长,进行染色涂片以分辨是否为金黄色葡萄球菌。5.清理切片的制作:将以上方法摘除的眼球固定于操作台上,在角膜上中处切开三角形窗,边长约为 Zmm,以便使 10%福尔马林充分作用,72小时后分离出视网膜。然后脱水,石蜡包埋,切J,进行 *E染色,封片。6,观察方法:化脓性眼内炎的观察指标有很多,木实验主要以观察第7大玻璃体混浊程度和细菌培养阴性率为主。7t统计学方法:统计第7大玻璃体混浊程度和细菌培养结果阴性 2率,实验数据应用X‘检验。 实 验 结 果 1.临床观察玻璃体所见:在第7大玻璃体混浊程度为十的第一组 万0O)和第二组对5.5o)比较,无显著性差异(P>0.05);第三组历}9%)与第一组和第二组有显著性差异o<0刀5)。第四组混浊最重。 2.细菌培养结果:第 7大细菌培养阴性率第一组“0%)和第二组万8.2%)比较,无显著性差异o>O.“);第三组 门3.9O)与第一组和第H组有显著性差异(P ndo.05),第四组第7大细菌培养阴性率为0。 3.视网膜组织光镜所见:模型眼的视网膜内界膜不完整,神经节细胞出现空泡;第一组和第二组在第七大视网膜损伤位于内界膜、神经节细胞和内丛状层;第三组损伤局限于内界膜和神经节细胞层;第四组视网膜各层结构均发生变化 讨 论 化脓性眼内炎能迅速而严重地损害眼内组织,如不及时治疗,常以丧夫视力乃至眼球萎缩而告终。因此早期诊断和采用合适的治疗尤为重要。通过比较四组间第7大玻璃体混浊情况。细菌培养阴性率及视网膜组织病理变化,发现如下规律及特点: I)第7大细菌培养结果: 3 第7大细菌培养阴性率庆大霉素组为60%,C开。组为58.2%,庆大霉素十C少。组为73.9%,而消毒空气组为0。在前三组中,第三组明显要好于前两组效果o.05),而第一组和第二组相*差异刁显著(P>0.05)。 *述结果表明惰性气体C止。可将早期化脓性服内炎阴转率提高,作用结果与庆大霉素相似;如果联合用药的作用结果要好于单独用药。 (二)病理组织学改变: 动物模型的视网膜病变是内界膜的完整性遭到破坏,神经节细胞出现空泡:在第七天时,第一组和第二组视网膜损伤在内界膜、神经节细胞和内丛状层;第三组损伤局限于内界膜和神经节细胞层;第四组视网膜各层结构均发生变化。由此可以看出:第二组作用7大后的眼内炎视网膜病变范围最小,第一组和第二组大致相同,第四组病变范围及程度最重。 (三)C少。对化脓性眼内炎可能的作用机制: 我们根据惰性气体的特点设想:惰性气体由于膨胀占据了玻璃