论文部分内容阅读
虫草棒束孢Isaria farinosa(Holmskiold) Fries是一种具有极其广泛地理分布和寄主的虫生真菌，在生物防治方面有着广泛的应用价值。蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyceshepiali是一种被用作冬虫夏草的替代品的真菌，已证实具有丰富的药理学活性。然而，分类学上确定蝙蝠蛾拟青霉是虫草棒束孢的异名，表明这一物种在应用上的不同菌株可能在代谢产物与生物活性方面存在较大差异。 本研究选用不同地理来源、不同分离基质的7个虫草棒束孢菌株，比较菌株间代谢产物成份，以及抗氧化、抑菌活性作用的差异。同时经活性追踪分离得到虫草棒束孢中的主要抑菌成分Paecilosetin，并通过细菌细胞内膜的通透性和外膜的完整性对Paecilosetin抑菌机制做了初步探索。通过HPLC代谢产物图谱分析比较了不同来源菌株的代谢产物组成，发现其代谢产物在产量和种类上均有明显差异，初步推测其原因与分离基质有关。经四种抗氧化模型和对9种指示菌的抑制实验发现，菌株间活性亦存在差异。此外通过活性实验比较发现，培养方式和提取方式对活性结果有影响。固体培养方式更有利于虫草棒束孢产生多样的次级代谢产物，乙醇提取的方法能更全面反应虫草棒束孢的生物活性。采用活性追踪方法分离得到虫草棒束孢的主要抑菌物质----Paecilosetin，其抑菌效果较粗提物提高了640倍。此外细胞毒活性结果显示，在6.25μg/ml时，Paecilosetin对人肝癌细胞株HepG2抑制率可达80％，同时对人正常肝细胞株L02生长促进率达40％，显示具有一定的应用前景。通过细菌细胞内膜的通透性和外膜的完整性，对Paecilosetin的抑菌机制进行了初步探讨，结果显示Paecilosetin可引起胞内大分子的轻微外泄，但并不破坏细胞膜。推测Paecilosetin很有可能通过进入细胞，影响细菌蛋白质或DNA的合成，从而抑制细菌增殖。