目的：肾脏纤维化包括肾小球硬化与肾间质纤维化，是各种原发、继发肾小球疾病和非肾小球疾病所致肾脏疾病终末期的共同表现。大量研究表明肾间质纤维化程度对长期肾功能来说更为重要，因此肾间质纤维化越来越多地受到人们的重视。如何防治肾间质纤维化成为目前肾脏病领域的研究热点之一。作为抑制肾间质纤维化调节因子的肝细胞生长因子(HGF)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)，目前在肾脏领域颇受重视。HGF在肾脏主要表达于肾间质细胞、肾小球内皮细胞和巨噬细胞，以内分泌、自分泌和旁分泌的形式特异性作用于靶细胞，发挥其对肾脏的保护作用。而BMP-7属于转化生长因子-β(TGF-β)超家族，它不仅在肾脏的发生作用中发挥至关重要的作用，并且可以治疗多种肾小管和肾间质疾病。伴随抑制纤维化因子而来的致纤维化因子TGF-β1的高表达参与肾间质纤维化的各个步骤，其诱导的信号传导通路激活是上皮-间充质转化(Epithelial-Mesenchymal TransitionEMT)机制中最为重要的环节，抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)在肾间质纤维化发生发展中的作用，可能是一种有效的防治纤维化的手段。1，25(OH)<,2>D<,3>作为维生素D(VitD)经肝、肾代谢后的主要活性形式，具有很重要的生物学活性。在维持机体正常钙磷代谢及骨的正常发育中起着关键作用。然而，近年来随着对1,25(OH)<,2>D<,3>的不断研究，其肾脏保护作用已不仅仅局限于对血钙、磷和PTH水平的调节，但其确切机制尚未明了，对于这种新机制的研究有助于重新评价1，25(OH)<,2>D<,3>在治疗肾脏病中的意义。单侧输尿管接扎(UUO)是一成熟的肾间质纤维化模型，肾小球病变不明显，本试验以此动物模型为平台，选用1，25(OH)<,2>D<,3>干预，通过观察肾脏病理改变、免疫组织化学方法检测HGF、BMP-7、TGF-β1的表达变化，从细胞水平探讨1，25(OH)<,2>D<,3>抗肾间质纤维化，保护肾功能的机制。 方法：选择清洁级健康雄性Wistar大鼠54只，体重(200±10)克，随机分为三组：假手术组(A组)，输尿管结扎组(UUO组即B组)，1，25(OH)<,2>D<,3>治疗组(C组)，每组各18只。每组又因于术后第3、7、14天分批处死而分为N<,3>、N<,7>、N<,14>组，每组各6只。将各组大鼠以水合氯醛(0.1ml/kg)腹腔注射麻醉后，行左侧耻骨上切口，沿左肾下极寻找到左侧输尿管，在中上1/3处用4号线上下结扎两处，然后从中剪断输尿管，以防逆行性感染，假手术组除不结扎和剪断输尿管外，其他手术过程同前。术后各组大鼠均正常饮食。1，25(OH)<,2>D<,3>治疗组大鼠以0.1 mL1，25(OH)<,2>D<,3>混悬液9ng/100g/d灌胃，1次/日；假手术组和UUO组大鼠用等量花生油灌胃，1次/日三组均于术前一天开始灌胃至术后第3天、第7天和第14天，分三批留取标本。输尿管结扎术后分别于第3、7、14天处死，大鼠处死前留取血标本，检测血清钙(Ca)、磷(P)浓度，迅速取出左肾，按冠状位纵形切开，取肾组织的1/2置于10％福尔马林固定液固定，酒精逐级脱水，二甲苯透明石蜡包埋，制成5um切片。光镜HE、Masson染色观察肾脏病理变化。采用免疫组织化学染色测定肾间质BMP-7、HGF、TGF-β1的表达，结果应用图像分析系统进行半定量分析。实验结果均以均数±标准差(x±s)表示，各组间比较采用单因素方差分析，应用SPSS 11.0统计分析软件对实验数据进行统计学处理，P<0.05为有统计学意义。 结果：与A组相比，B组及C组的血Ca、P轻度升高但无统计学差异。光镜下观察，HE及Masson染色A组未见异常，B组及C组各时相点大鼠肾脏肾小球无明显变化。HE染色B组术后3天肾小管扩张不明显，间质中少量单核细胞与淋巴细胞浸润，肾间质宽度增加；B组7天可见。肾小管扩张明显，上皮细胞变性、水肿、甚至坏死，肾间质大量炎症细胞浸润，间质宽度明显增加，偶见萎缩肾小管；B组14天上述病变加重，可见弥漫的肾小管基底膜增厚皱缩，小管基底膜不同程度断裂，皮质及外髓萎缩的肾小管较多，间质中大量淋巴单核细胞浸润，纤维化较明显。Masson染色可见B组术后3天肾小管扩张，肾间质宽度增加，胶原纤维增加，染色加深；此后，病变逐渐加重。C组与B组平行相比肾小管间质病变程度明显减轻，肾间质相对面积明显减少(P<0.01)。三组间比较均有统计学差异(P<0.01)。免疫组织化学结果显示：BMP-7在A组高度表达，肾脏髓质区表达明显高于皮质区的表达，主要分布于肾小管及肾间质，在升支小管上皮、远曲小管、集合管均有表达，在直部及皮髓质交界处染色最强，近曲小管仅有少量表达，而在肾小球内基本无表达。在B组各时相点BMP-7蛋白的表达随时间呈进行性下降，且随着梗阻时间延长减弱程度更加明显，第14天表达最弱，几乎无明显阳性表达。B组组间及与A组同时相点相比均有统计学差异(P<0.05)。C组术后第3天、第7天、第14天BMP-7的表达均显著高于同时期B组的表达(P<0.05)。HGF在肾小管间质的表达：在A组各时期均几乎无表达。在B组、C组主要表达于肾小管上皮细胞，肾间质有少量表达，3天时HGF表达较正常轻度增高，7天时表达至高峰，14天时表达减少，有统计学意义(P<0.05)。C组与B组同时相点相比HGF的表达均增高，组间、组内均有统计学差异(P<0.05)。TGF-β1在肾小管间质的表达：在A组各时期仅肾小球、肾小管间质微量表达，主要分布于肾小管上皮细胞胞浆内，B组各时相点TGF-β1蛋白的表达随时间呈进行性升高，且随着梗阻时间延长升高程度更加明显，至第14天表达最强。组间、组内均有统计学差异(P<0.05)。进一步对各组BMP-7、HGF蛋白的表达与TGF-β1的表达进行相关性分析，结果显示，BMP-7、HGF与TGF-β1的表达均显著负相关(P<0.05)。 结论：本实验进一步证实了BMP-7、HGF及TGF-β1的表达部位及其表达与肾间质纤维化的关系。且1，25(OH)<,2>D<,3>能够明显减轻肾间质纤维化，上调BMP-7、HGF蛋白的表达，进而使TGF-β1的表达下降，从而发挥其在单侧输尿管结扎模型中对肾脏的保护作用，延缓和抑制了肾间质纤维化的发展。研究也发现1，25(OH)<,2>D<,3>抑制和延缓肾间质纤维化的进展，不依赖于其对钙磷的调节作用。