苏云金芽胞杆菌发酵液微滤浓缩和微胶囊剂的研究

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本文采用膜分离技术改进传统的苏云金芽胞杆菌后处理工艺。确定了无机陶瓷膜微滤浓缩苏云金芽胞杆菌发酵液的工艺条件,系统地研究了微滤浓缩液的流变特性,以及微滤浓缩处理对发酵液特性及其喷雾干燥的影响。结果表明,微滤浓缩工艺优于传统的离心浓缩工艺。木文还制备了苏云金芽胞杆菌微胶囊剂,该制剂的贮存稳定性和田间残效期都有所提高。 苏云金芽胞杆菌发酵液微滤膜通量在10min之内迅速下降,并在此后1个小时内基本稳定在80L·m-2·h-1水平。根据膜通量的变化确定了微滤浓缩的较优工艺条件:操作压力0.12~0.14MPa,温度40~45℃,pH值4.5~5.0。不同温度下发酵液的表观黏度与膜通量成反比,因此温度对膜通量的影响是通过改变黏度来改变膜通量的。 在15~50℃、电机转速为75~750r/min下,用L-90型流变仪测定了苏云金芽胞杆菌发酵成熟醪液及其微滤浓缩液的流变特性。分析结果显示:幂律方程适于描述发酵液及其微滤浓缩液的流变曲线,它们的流变指数n值均小于1(n=0.7347~0.9748),这表明苏云金芽胞杆菌发酵液及其微滤浓缩液均为拟塑性流体。随着浓度的上升,稠度系数上升,流变指数下降。对所测表观黏度数据进行回归分析发现,温度对表观黏度的影响符合Arrhenius方程,不同浓度下的浓缩液的表观黏度与浓度的关系符合关系式ηa=a exp(bC2),并求得了浓度和温度对苏云金杆菌浓缩液表观黏度综合影响的数学模型,它可被用来预测不同浓度和温度条件下的表观黏度。 研究了浓缩处理对苏云金芽胞杆菌发酵液芽胞数、晶体含量、效价和黏度的影响。经离心和微滤浓缩处理后,发酵液的密度、黏度和含固量增加,芽胞数、晶体含量和效价提高,效价收率随浓缩倍数的增加而降低。发酵液微滤浓缩2.94倍晶体收率87.4%,芽胞收率100%,效价收率71.6%,上清液中并未测出晶体蛋白条带。微滤浓缩会引起上清液中的增效物质的损失,但微滤浓缩引起的效价损失要小于离心浓缩。将浓缩10倍的上清液加入浓缩液中,浓缩液的效价增至原来的2.01倍。 将发酵液直接喷雾干燥所得的原粉效价和质量收率分别为51347IU/mg和75.52%,微滤浓缩液的分别为56239IU/mg和73.48%;在添加填料后,发酵液的效价和质量收率分别为53358IU/mg和92.70%,微滤浓缩液的分别为56209IU/mg和72.50%。由此可见,对于发酵液而言,添加适量的填料可以提高质量收率,而对于浓缩倍数较高的浓缩液而言,添加填料作用并不明显。 通过单因素实验及正交实验确定了制备微胶囊的复合凝聚体系的最佳条件,并在此基础上制备了苏云金芽胞杆菌微胶囊制剂。通过紫外线处理发现微胶囊制剂有较强的抗紫外线能力。紫外照射处理8h,微胶囊剂的效价增幅为4.6~43.2%,芽胞存活
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