【摘 要】
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目的:本研究通过对比上皮性卵巢癌与卵巢良性组织标本中ORP-150的表达情况,探讨ORP-150异常表达与上皮性卵巢癌不同组织类型、分化程度、临床分期的关系;通过体外实验,研究ORP-150基因敲减对上皮性卵巢癌细胞表型的影响,初步探讨其中可能的分子机制。方法:采用免疫组化实验,对比分析上皮性卵巢癌与正常组织、卵巢良性组织中ORP-150的表达量,观察ORP-150表达量与上皮性卵巢癌不同病理类型
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目的:本研究通过对比上皮性卵巢癌与卵巢良性组织标本中ORP-150的表达情况,探讨ORP-150异常表达与上皮性卵巢癌不同组织类型、分化程度、临床分期的关系;通过体外实验,研究ORP-150基因敲减对上皮性卵巢癌细胞表型的影响,初步探讨其中可能的分子机制。方法:采用免疫组化实验,对比分析上皮性卵巢癌与正常组织、卵巢良性组织中ORP-150的表达量,观察ORP-150表达量与上皮性卵巢癌不同病理类型、不同分化程度和不同临床分期之间的关系,结果运用非参数检验方法统计;采用si RNA干扰技术实现对ORP-150基因的敲减,通过q PCR实验和免疫印迹实验验证敲减效率;采用CCK-8实验检测敲减ORP-150基因后对卵巢癌细胞增殖能力的影响,克隆形成实验检测敲减ORP-150基因后对卵巢癌细胞克隆能力的影响,采用划痕实验、transwell实验检测敲减ORP-150基因后对卵巢癌细胞扩散以及侵袭迁移能力的影响,采用流式细胞术检测敲减ORP-150基因后对卵巢癌细胞凋亡的影响,数据均采取单因素t检验;最后,利用Western-blot实验探讨ORP-150基因敲减后影响细胞表型改变的可能作用机制。结果:ORP-150在卵巢正常组织及良性组织中的表达量低于上皮性卵巢癌中的表达量（P＜0.01）。在上皮性卵巢癌患者中,临床FIGO分期III-IV期患者比I-II期患者ORP-150表达量高（P＜0.05）,病理为低分化患者比高分化的患者表达量高（P＜0.05）,但在上皮性卵巢癌各种病理类型间比较无统计学差异（P＞0.05）;si RNA介导的ORP-150基因敲减可以明显抑制人卵巢癌细胞SKOV-3的增殖能力、克隆形成能力（P＜0.05）;同时在划痕实验及transwell实验中ORP-150敲减组相较于对照组,卵巢癌细胞跨膜转移及扩散能力降低（P＜0.05）,但侵袭能力无明显差异;最后流式细胞术提示ORP-150基因敲减组存在有较多凋亡状态的细胞;进一步探讨其可能存在的机制,发现敲减ORP-150基因后的卵巢癌细胞可能通过Wnt信号通路、Caspase级联反应影响细胞的修复,最终抑制细胞增殖,促进凋亡的发生。结论:ORP-150在上皮性卵巢癌中呈现高表达,并且病理分化程度越低、临床分期越高,ORP-150的表达水平越高;ORP-150的高表达可能是通过影响Wnt信号通路、Caspase级联反应从而促进卵巢癌的发生发展。
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