手性聚氨基酸作为潜在的免疫佐剂的性能表征

来源 :长春工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanwenrui
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聚氨基酸具有良好的生物相容性和生物降解性,已广泛应用于组织工程和药物传递中。并且在过去的几年中,由于聚氨基酸可建立炎症微环境以促进免疫反应,多肽材料已被应用为潜在的免疫佐剂。目前大多数的免疫佐剂所建立的炎症微环境无法控制,达不到理想的免疫反应。为解决上述问题,本工作中我们设计了不同手性的多肽基水凝胶和纳米胶束,通过对其理化性能以及在体内所引起的炎症细胞因子的表征,验证材料所引起的不同的炎症反应。具体如下:(1)通过聚乙二醇单甲醚引发N-羧酸酐(NCA)开环聚合合成了四种不同手性的聚乙二醇单甲醚-聚丙氨酸嵌段共聚物,并利用核磁共振氢谱(1H NMR)、傅里叶红外光谱(FT-IR)以及凝胶渗透色谱(GPC)分析了嵌段共聚物的结构;并通过试管倒置法观察了嵌段共聚物在磷酸盐缓冲液中的成胶性能,结果显示其中三种可形成凝胶结构;通过动态力学分析、扫描电镜(SEM)分析水凝胶的力学性能和表面形貌;通过变温圆二色谱(CD)、变温动态光散射(DLS)、变温核磁碳谱(13C NMR)探究其成胶机理;并由苏木精和伊红(H&E)染色、免疫组化以及半定量分析探究其体内所引起的炎症程度。结果表明D型水凝胶能引起更明显的炎症反应,因此可通过调节D型氨基酸的组份而控制炎症反应,从而得到理想的免疫反应。(2)通过正己胺引发NCA开环聚合合成了两种不同手性的聚–L–苯丙氨酸—聚赖氨酸嵌段共聚物,通过1H NMR、FT-IR分析了嵌段共聚物的结构;并将嵌段共聚物通过纳米沉淀法制成纳米胶束,随后通过DLS、透射电镜(TEM)分析其粒径及形貌;其次,通过流式细胞术(FCM)以及酶联免疫吸附试验(ELISA)分析了嵌段共聚物的细胞内吞情况和刺激细胞所产生的白介素-6(IL-6)的含量。结果同样表明,D型纳米胶束能加速细胞内吞,刺激细胞产生更多的IL-6。因此,D型纳米胶束同样可应用于免疫治疗中。通过设计不同手性的聚氨基酸材料作为潜在的免疫佐剂以得到不同程度的免疫反应,该策略在免疫治疗中具有良好的应用前景。
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