AG490对人胃癌裸鼠移植瘤中瘦素、JAK2/STAT3信号通路的影响

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目的:探讨在JAK2/STAT3信号通路阻滞剂AG490的干预下,瘦素(Leptin)和JAK2/STAT3信号通路对人胃癌裸鼠移植瘤生长的影响,以及与其基因转录、蛋白表达水平之间的关系。方法:实验动物为30只BALB/c-nu雄性裸鼠,选用SGC-7901人胃腺癌细胞株,于动物皮下注射,形成胃癌移植瘤,构建动物模型。将成瘤动物随机分为三组,每组10只。A组为对照组,B组腹腔注射8mg/kg AG490,C组腹腔注射50mg/kg 5-FU。其中腹腔注射的频次为每3天注射1次,共注射4次,停药次日处死裸鼠,采集各组肿瘤组织,称量各组裸鼠皮下瘤肿瘤的重量并做好记录,计算各组裸鼠的肿瘤生长抑制率,制作肿瘤组织的组织病理学切片,并以RT-PCR和免疫组化的方法检测Leptin、JAK2、STAT3在肿瘤组织中mRNA和蛋白的表达。结果:(1)肿瘤大体情况:与对照组A组比较,B组和C组裸鼠的瘤重均显著减轻(均为P﹤0.05),而B、C两组之间进行比较时,结果无差异(P>0.05)。(2)组织病理学切片结果:各组结果均为较典型的癌细胞表现,其中对照组A组的肿瘤组织坏死部分较少,而B组和C组的肿瘤组织中坏死部分相对较多。(3)RT-PCR结果:与A组比较,B组和C组的Leptin m RNA表达都明显减低(均为P<0.01),而B、C两组之间进行比较时,结果无差异(P>0.05);与A组JAK2 mRNA的表达比较,B组的表达减低(P<0.01),而C组的表达略有升高(P=0.028<0.05);与A组STAT3 mRNA的表达相比较,B组的表达明显下降(P<0.01),而C组表达无差异(P>0.05)。(4)免疫组化结果:与A组Leptin蛋白的表达相比较,B组和C组的Leptin蛋白表达都明显减低(均为P<0.01);与A组JAK2蛋白的表达比较,B组的表达减低(P<0.01),而C组表达无差异(P>0.05);与A组STAT3蛋白的表达比较,B组的表达减低(P<0.01),C组的表达结果无差异(P>0.05)。结论:Leptin的高表达可能与胃癌的发生和发展存在联系,AG490和5-FU具有抑制胃癌细胞增殖的功能,这可能通过降低Leptin的表达来实现;Leptin与JAK2/STAT3信号通路可能存在一定的联系,AG490降低Leptin的表达水平的功能,可能是通过JAK2/STAT3信号通路实现的。除了这种方式,可能还存在其他途径调节Leptin的表达。
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