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背景：
冠状动脉搭桥围手术期是临床冠心病治疗的关键时期，积极运用中医药防治手段，对本阶段的治疗具有重要意义。其中全面掌握该阶段证候要素演变规律对围手术期患者诊疗方案的制定具有一定的指导作用，主要表现在：减少术后并发症以及提高手术远期疗效等方面。miRNA是一种非编码单链RNA分子，在基因表达的转录后调节中起重要作用。近年来，开展了大量关于miRNA与冠心病发生机制的研究。在中医领域则开展了miRNA与冠心病中医证型的相关性研究。但目前尚无研究探索冠状动脉搭桥围手术期与相关miRNA差异表达的关联。因此，本研究将采用miRNA芯片技术初步探索冠状动脉搭桥围手术期患者证候要素改变及其与miRNA表达谱的相关性。
目的：
研究冠脉搭桥围手术期患者证候要素分布情况及演变规律，检测冠脉搭桥患者miRNA表达特点及手术前后的表达差异。
方法：
1、通过收集文献、相关证候要素诊断标准，归纳总结制定临床调查问卷。收集2017年12月-2018年12月在首都医科大学附属北京安贞医院心外科六病房就诊符合冠心病心绞痛诊断并且符合纳入标准的患者，分别于术前以及术后3天、术后5天、术后7天采集患者基本资料以及中医四诊信息，按照统一要求完成临床调查问卷。采用EpiData3.1软件建立数据库，将纳入患者各项临床资料及中医症状数据均录入该数据库，采用背对背录入的方法进行，录入完毕，对双录入的内容进行一致性检验，再行逻辑纠错，最终导出数据。然后根据冠心病心绞痛常见证候要素诊断标准对数据进行判别。并采用SPSS22.0统计软件录入数据后进行统计学分析，比较不同时间节点痰浊、气虚、血瘀、热蕴、气滞、阳虚、阴虚、寒凝的分布差异，以及不同时间节点证候要素变化的差异。
2、随机抽取5例患者分别于术前以及术后3天完成血液标本采集，从血液标本中分离并纯化白细胞，Trizol法提取总RNA，利用HumanmiRNAMicroarrayKit,Release21.0,8x60K芯片检测5例冠心病患者行冠脉搭桥术前后的基因表达谱，筛选出差异表达的miRNA，并利用miRWalk3.0数据库以及miRDB数据库进行靶基因预测，并进行靶基因的GO和Pathway分析。
结果：
1、在72例累计242例次冠心病患者数据中，搭桥前后常见证候要素主要有痰浊、气虚、血瘀、热蕴、气滞、阳虚、阴虚。其中痰浊所占比例最大，其有可能是冠脉搭桥患者围手术期的主要证候要素。
2、冠脉搭桥患者不同时间节点7个证候要素的分布与演变过程：手术前，气虚、血瘀、气滞、痰浊占比较高，其中气虚（34.48%）最多；手术后3天，痰浊、气虚、热蕴为主，而痰浊（48.45%）最多；术后5天，仍以痰浊、气虚、热蕴为主，但痰浊（43.24%）稍有降低，而气虚（37.84%）有所上升；术后7天，痰浊、气虚、血瘀为主，痰浊（55.26%）占比仍为最高。
3、在单一时点上每个证候要素的演变过程来看，气虚在术前占比较高，术后虽稍有波动，但整体呈下降趋势；痰浊在术后3天达到高峰，其后随着病程进展逐渐下降；血瘀在术后得到较大改善；热蕴在术后3天稍有增高，其后逐渐下降；气滞、阳虚、阴虚术后均明显下降。
4、本研究发现共有8个miRNA在冠脉搭桥前后存在显著的差异表达，其中6个miRNA上调，2个miRNA下调。6个上调的miRNA分别是：hsa-miR-148a-3p、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-550a-3p、hsa-miR-4698、hsa-miR-1229-5p，下调的miRNA是hsa-miR-486-3p、hsa-miR-1275。
5、GO富集分析显示：在生物学过程方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于99个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于173个条目；在细胞组分方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于25个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于19个条目；在分子功能方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于38个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于42个条目。
6、靶基因Pathway分析显示：miRNA靶基因与MAPKsignalingpathway、Calciumsignalingpathway、RNAdegradation、Wntsignalingpathway等通路相关。
结论：
1、通过研究发现冠心病患者从冠状动脉旁路移植术前到手术后7天的证候要素存在演变规律。2、在72例累计242次患者资料中痰浊、气虚、血瘀与热蕴占较高比例，不同时间节点7个证候要素的分布、演变过程不同。3、miRNA的表达异常可能参与了冠脉搭桥围手术期证候要素的改变，体现了证候要素的演变趋势，通过GO以及KEGG富集分析，为其机制研究指明了一定的研究方向。
冠状动脉搭桥围手术期是临床冠心病治疗的关键时期，积极运用中医药防治手段，对本阶段的治疗具有重要意义。其中全面掌握该阶段证候要素演变规律对围手术期患者诊疗方案的制定具有一定的指导作用，主要表现在：减少术后并发症以及提高手术远期疗效等方面。miRNA是一种非编码单链RNA分子，在基因表达的转录后调节中起重要作用。近年来，开展了大量关于miRNA与冠心病发生机制的研究。在中医领域则开展了miRNA与冠心病中医证型的相关性研究。但目前尚无研究探索冠状动脉搭桥围手术期与相关miRNA差异表达的关联。因此，本研究将采用miRNA芯片技术初步探索冠状动脉搭桥围手术期患者证候要素改变及其与miRNA表达谱的相关性。
目的：
研究冠脉搭桥围手术期患者证候要素分布情况及演变规律，检测冠脉搭桥患者miRNA表达特点及手术前后的表达差异。
方法：
1、通过收集文献、相关证候要素诊断标准，归纳总结制定临床调查问卷。收集2017年12月-2018年12月在首都医科大学附属北京安贞医院心外科六病房就诊符合冠心病心绞痛诊断并且符合纳入标准的患者，分别于术前以及术后3天、术后5天、术后7天采集患者基本资料以及中医四诊信息，按照统一要求完成临床调查问卷。采用EpiData3.1软件建立数据库，将纳入患者各项临床资料及中医症状数据均录入该数据库，采用背对背录入的方法进行，录入完毕，对双录入的内容进行一致性检验，再行逻辑纠错，最终导出数据。然后根据冠心病心绞痛常见证候要素诊断标准对数据进行判别。并采用SPSS22.0统计软件录入数据后进行统计学分析，比较不同时间节点痰浊、气虚、血瘀、热蕴、气滞、阳虚、阴虚、寒凝的分布差异，以及不同时间节点证候要素变化的差异。
2、随机抽取5例患者分别于术前以及术后3天完成血液标本采集，从血液标本中分离并纯化白细胞，Trizol法提取总RNA，利用HumanmiRNAMicroarrayKit,Release21.0,8x60K芯片检测5例冠心病患者行冠脉搭桥术前后的基因表达谱，筛选出差异表达的miRNA，并利用miRWalk3.0数据库以及miRDB数据库进行靶基因预测，并进行靶基因的GO和Pathway分析。
结果：
1、在72例累计242例次冠心病患者数据中，搭桥前后常见证候要素主要有痰浊、气虚、血瘀、热蕴、气滞、阳虚、阴虚。其中痰浊所占比例最大，其有可能是冠脉搭桥患者围手术期的主要证候要素。
2、冠脉搭桥患者不同时间节点7个证候要素的分布与演变过程：手术前，气虚、血瘀、气滞、痰浊占比较高，其中气虚（34.48%）最多；手术后3天，痰浊、气虚、热蕴为主，而痰浊（48.45%）最多；术后5天，仍以痰浊、气虚、热蕴为主，但痰浊（43.24%）稍有降低，而气虚（37.84%）有所上升；术后7天，痰浊、气虚、血瘀为主，痰浊（55.26%）占比仍为最高。
3、在单一时点上每个证候要素的演变过程来看，气虚在术前占比较高，术后虽稍有波动，但整体呈下降趋势；痰浊在术后3天达到高峰，其后随着病程进展逐渐下降；血瘀在术后得到较大改善；热蕴在术后3天稍有增高，其后逐渐下降；气滞、阳虚、阴虚术后均明显下降。
4、本研究发现共有8个miRNA在冠脉搭桥前后存在显著的差异表达，其中6个miRNA上调，2个miRNA下调。6个上调的miRNA分别是：hsa-miR-148a-3p、hsa-miR-199b-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-550a-3p、hsa-miR-4698、hsa-miR-1229-5p，下调的miRNA是hsa-miR-486-3p、hsa-miR-1275。
5、GO富集分析显示：在生物学过程方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于99个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于173个条目；在细胞组分方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于25个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于19个条目；在分子功能方面上调表达的miRNA的靶基因显著富集于38个条目，下调表达的miRNA的靶基因显著富集于42个条目。
6、靶基因Pathway分析显示：miRNA靶基因与MAPKsignalingpathway、Calciumsignalingpathway、RNAdegradation、Wntsignalingpathway等通路相关。
结论：
1、通过研究发现冠心病患者从冠状动脉旁路移植术前到手术后7天的证候要素存在演变规律。2、在72例累计242次患者资料中痰浊、气虚、血瘀与热蕴占较高比例，不同时间节点7个证候要素的分布、演变过程不同。3、miRNA的表达异常可能参与了冠脉搭桥围手术期证候要素的改变，体现了证候要素的演变趋势，通过GO以及KEGG富集分析，为其机制研究指明了一定的研究方向。