红花颗粒抗D-GlaN致急性肝损伤药理作用及药代动力学研究

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目的:采用正交试验优选红花最佳醇提方法和红花颗粒最佳成型工艺,研究红花颗粒对大鼠D-Gla N致急性肝损伤药理作用及红花颗粒和羟基红花黄色素A在大鼠体内的药动学特征。方法:(1)以羟基红花黄色素A的含量和浸膏率为综合指标,采用L9(34)正交试验,确定红花最佳醇提方法。(2)通过单因素实验筛选影响因素,以颗粒成型率、吸湿率、休止角为综合评分,采用L9(34)正交试验确定红花颗粒最佳成型工艺。(3)将wistar大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组、红花颗粒高、中、低剂量组、乳糖(辅料)组,分别灌胃护肝片、红花颗粒、乳糖溶液每天1次,连续21天灌胃给药,末次给药以后除正常组和乳糖组分别腹腔注射D-Gla N生理盐水溶液造肝损伤模型,禁食不禁水,12h后水合氯醛麻醉,取血,3500r/min离心10min分离血清,冻存,待测AST、ALT血清指标,从肝脏相同部位取部分肝组织在20%甲醛溶液中固定,观察病理学变化。(4)将wistar大鼠随机分为两组,红花颗粒组和羟基红花黄色素A组,每组设6只,给药后,禁食不禁水18个小时后,分别在0h、0.25h、0.5h、0.75h、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h、6h等时间点眼后静脉丛采血0.4m L将全血样品置于1.5m LEP管中,12000r/min离心10min,吸取上层血浆并置于-20℃冰箱中保存,用高效液相进行分析。结果:(1)红花最佳醇提工艺:料液比为1:12,用70%乙醇提取2次,每次4h,浓缩滤液,冷冻干燥,得浸膏;(2)红花颗粒最佳成型工艺为浸膏与辅料的比例为2:1,加75%的乙醇2.5m L制得的颗粒成型最好;(3)红花颗粒明显降低D-Gla N致急性肝损伤大鼠血清AST、ALT活性,且肝细胞坏死明显减少,大部分恢复正常,因此红花颗粒有明显的降低D-Gla N诱导的急性肝损伤作用;(4)红花颗粒和HSYA在大鼠体内药动学参数为:Cmax分别为(2.12±0.52)ug/L和(2.32±0.41)ug/L,Tmax分别为(1.25±0.27)h和(1.17±0.26)h,AUC(0-t)分别为(4.67±0.48)ug/L*h和(4.78±0.42)ug/L*h,t1/2分别为(1.09±0.82)h和(0.79±0.71)h。结论:(1)实验确定的最佳提取工艺条件为进一步为红花醇提有效成分研究提供依据;(2)红花颗粒成型工艺简单,易操作,为红花剂型改革研究奠定基础;(3)红花颗粒具有一定的抗急性肝损伤的作用;(4)对红花颗粒做药代动力学研究及相关指标检测结果表示,用甲醇提取的红花制成的颗粒中HSYA的最高含量Cmax值比单HSYA的要高,且Tmax值也变长,因此可以知道,制成颗粒后的临床效果更好,药物作用力度变强且持久。
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