酱油渣是酱油酿造过程中的副产物,富含粗蛋白、碳水化合物及其他营养成分。本工作通过纤维素酶、碱性蛋白酶两阶段水解酱油渣制备水解液,利用水解液中营养成分培养原始小球藻。原始小球藻(Chlorella protothecoides)藻体富含蛋白质,广泛应用于食品、蛋白饲料。本工作拟利用酱油渣水解液培养原始小球藻联产鱼类蛋白饲料,主要包括以下内容:(1)复合纤维素酶和碱性蛋白酶水解酱油渣制备酱油渣水解液表面响应法优化复合纤维素酶水解酱油渣水解条件为料液比1:10、酶添加量1.6%、p H 4.2、温度50℃,时间113 min,还原糖得率为7.06%。在复合纤维素酶水解酱油渣的基础上继续进行碱性蛋白酶水解酱油渣,最优水解条件为p H 8.0、温度50℃、酶添加量2.00%、反应时间为100 min。所得酱油渣水解液化学成分和Basal培养基对比,水解液中Na~+浓度偏高,K、Mg、Ca等大量元素浓度没有明显差别,还原糖浓度稍低,但铵态氮浓度高,具有培养原始小球藻的的潜在应用。(2)酱油渣水解液培养原始小球藻条件优化Basal培养基稀释酱油渣水解液的最优稀释倍数为6倍,优化C、N、P源最佳浓度分别为15.00 g/L、1.00 g/L、1.25 g/L,再以葡萄糖为碳源、酱油渣水解液为氮源,补料培养原始小球藻,连续培养264 h,生物量和蛋白质产量分别达到7.65 g/L和3.21 g/L。(3)鱼类肠道粗酶对小球藻蛋白饲料的体外模拟消化原始小球藻粗蛋白含量约为44%,粗油脂含量约为33%,碳水化合物含量约为12%,粗纤维含量约为3.4%,经氨基酸成分分析,原始小球藻含有八种必需氨基酸,蛋氨酸为第一限制氨基酸,EAAI>0.95;微生物指标和重金属含量均在饲料卫生标准规定的允许检出范围内,说明酱油渣水解液培养的原始小球藻适合作为鱼类的优质蛋白饲料。鲫鱼、草鱼肠道粗酶提取液体外消化原始小球藻粉,两种淡水鱼肠道粗酶提取液对小球藻粉均有良好的消化性能。