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目的以UU1感染和非感染的人正常子宫内膜上皮细胞为研究对象,应用蛋白质组学技术,分析比较在感染与非感染UU1的情况下,人子宫内膜上皮细胞胞内蛋白质的表达变化,并对其进行生物信息学分析,期望找到与UU发病相关的蛋白质,为研究UU发病机制、筛选UU感染相关标志物提供新的研究方法和线索。方法本课题采用体外实验的方法,以人正常子宫内膜上皮细胞作为模型进行研究,首先以不同浓度UU1感染人子宫内膜上皮细胞,然后通过MTT实验,测定人子宫内膜上皮细胞感染后的存活率,选用1×107copy/ml UU1感染人子宫内膜上皮细胞,并设阴性对照组(不添加UU1仅加等量的新鲜UU培养液),于24小时后分别提取细胞内的蛋白质,处理结束后,提取各组的胞内蛋白质,经2D Clean-up试剂盒纯化,进行蛋白质定量,并用荧光染料Cy2、Cy3及Cy5进行标记,然后将各组蛋白进行2D-DIGE电泳,得到Cy2、Cy3及Cy5标记的非感染和UU1感染的人子宫内膜上皮细胞凝胶图谱,通过DeCyder6.5差异分析软件进行分析比对后,再通过MALDI-TOF-MS质谱对其进行鉴定,并利用生物信息学对质谱鉴定出的差异蛋白质进行分析。结果建立了非感染和UU1感染的人子宫内膜上皮细胞凝胶图谱。通过DeCyder6.5软件分析,UU1处理人子宫内膜上皮细胞24小时后发现有41个蛋白点与对照组比较在量上显著增加,而有19个蛋白点表达明显降低。利用MALDI-TOF-MS技术,我们初步鉴定了52个在UU1处理组中表达有变化的蛋白点,其中上调表达蛋白质34个、下调表达蛋白质18个。在这些差异表达蛋白质中,我们通过生物信息学方法查询后发现,其主要的生物学功能涉及细胞生理过程的多个方面,包括细胞免疫及防御、细胞内蛋白转运、细胞内的信号传导级联反应、细胞周期、细胞形态发生、蛋白质翻译、修饰、水解与折叠、蛋白信号转导通路、RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录调控、钙离子介导的信号转导、物质代谢过程相关、核mRNA剪切及氧化磷酸化等方面。结论1、通过比较蛋白质组学的方法鉴定出52个差异表达的蛋白质,提示UU1感染人子宫内膜上皮细胞能引起细胞内蛋白质的差异表达。2、通过生物信息学分析对52个差异蛋白质进行了生物信息学分析,并对其进行了GO注释,提示UU1感染与细胞免疫及防御、细胞内蛋白转运、细胞内的信号传导级联反应、细胞周期、细胞形态发生等生物学过程相关。3、筛选了多个与UU1感染相关的差异蛋白质,其中热休克蛋白的表达上升可能与UU1感染引起细胞应激和诱导细胞凋亡有关；RNA结合蛋白的表达上升可能与UUl感染细胞后调节细胞内功能蛋白及结构蛋白的表达及细胞凋亡有关。