HSO14通过ERK1/2信号通路调节炎性因子参与CCI大鼠神经病理性疼痛

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目的本实验通过观察HS014(MC4R拮抗剂)和U0126(ERK抑制剂)对CCI大鼠热痛阈以及脊髓背角p-ERK和炎性因子TNF-α和IL-1β表达达的影响,讨论HSO14在神经病理性疼痛中所发挥的作用,探讨MC4R在此类型疼痛中的参与机制。方法选择96只健康的成年SD大鼠随机分成4组,每组24只。假手术组(SHAM组):暴露分离左侧坐骨神经后不做任何处理,然后正常饲养;CCI模型组:左侧坐骨神经暴露分离后,中段用羊肠线结扎;HS014组:CCI模型建立后,鞘内注射MC4R拮抗剂HS014,10μg/天,持续7天;U0126组:建立CCI模型建立后,鞘内注射ERK1/2拮抗剂UO1265μg/天,持续7天;术前1天和术后3天,7天,14天分别测定各组大鼠的机械热痛阈,Western blot检测腰段L4-L6脊髓背角MC4R、p-ERK蛋白的含量。免疫组化,观测背根神经节MC4R和p-ERK变化。ELISA测定L4-L6脊髓背角炎性因子TNF-α和IL-1β的变化。结果1.大鼠热痛阈(PWTL)结果:CCI术前基础痛阈各组组间差异无统计学意义(P>0.05);CCI模型组、HS014组、U0126组三组大鼠鞘内置管前后PWTL差异无统计学意义(P>0.05);与SHAM组比较,三组PWTL均出现下降(P<0.01);与CCI组比较,HS014组、U0126组于术后PWTL显著升高(P<0.05)。2.背根神经节(DRG)及L4-L6脊髓背角表达MC4R、p-ERK结果:与SHAM组比较,CCI模型组、HS014组、U0126组三组大鼠CCI术后MC4R、p-ERK表达增加(P<0.05)。与CCI组比较,HS014组MC4R、p-ERK表达显著减少(P<O.05),U0126组ERK1/2同样显著下降(P<0.05),MC4R却无显著变化(p>0.01)。3.L4-L6脊髓背角炎性因子TNF-α和IL-1β的变化结果:与SHAM组比较,CCI模型组、HS014组、U0126组三组大鼠CCI术后炎性因子TNF-α,IL-1β明显升高(CCI组P<0.01,HS014组、U0126组P<0.05);与CCI组比较,HS014组、U0126组炎性因子TNF-α,IL-1β明显降低(P<0.05)。结论1.MC4R及ERK1/2信号通路均参与神经病理性疼痛的调节2.ERK1/2信号通路可能是MC4R实现信号向细胞核内传导的下游通路之一。3.MC4R能够通过ERK1/2信号通路调节炎性因子TNF-α和IL-1β的表达从而参与CCI大鼠神经病理性疼痛的调节。
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