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假北紫堇(CorydalispseudoimpatiensFedde.)为罂粟科紫堇属草本植物,种质资源丰富,主要分布于我国青海、甘肃等地,生于海拔2850-4500m的山坡或山谷的石砾处。紫堇属植物含有相对丰富的生物碱类成分,如紫堇灵、异紫堇灵、乙酰紫堇碱、乙酰异紫堇碱和6-乙酰紫堇灵等。相关药理学研究表明,紫堇属植物表现出多种生物活性,具有抗氧化、抑菌、治疗心血管系统疾病、预防和治疗肿瘤和抗炎等生理作用。在传统藏医药中,紫堇属植物被广泛用于解毒、肝炎、胃炎、高血压等病症的治疗。然而,关于假北紫堇化学成分组成和生物活性的研究报道极少。为了明确假北紫堇的化学成分,更好地开发利用该藏药资源,在前人研究的基础上,本文对假北紫堇化学成分以及抑菌活性进行了较为系统的研究,主要取得了以下的研究成果和结论: 1.采用4因素3水平响应面法优化假北紫堇全草中总生物碱的提取工艺,根据单因素试验结果和Box-Behnken试验设计,得到了假北紫堇全草总生物碱的最佳提取工艺条件为:液料比25mL/g,提取时间100min,提取温度为53℃,乙醇体积分数为73%。在此条件下,总生物碱提取得率可达1.62%。响应面法筛选出的假北紫堇全草总生物碱提取工艺方法稳定、可行,重现性好。 2、以苯并[b]吖啶酮-5-乙基对甲苯磺酸酯(BAETS)为柱前荧光标记试剂,建立了一种基于高效液相-质谱联用技术的5种三萜酸成分定性与定量分析的检测方法,该方法的检测限可以达到0.71-1.02ng/mL。应用该方法对假北紫堇不同组织的三萜酸进行含量测定与分析,结果表明:假北紫堇各部位中三萜酸成分相似但含量存在差异,叶中三萜酸含量明显高于花和根。假北紫堇叶中白桦脂酸和齐墩果酸含量丰富,分别为30.21μg/g和25.32μg/g,其次为假北紫堇花。 3、以荧光试剂2-(4-氨基)苯基-1-氢-菲[9,10-d]咪唑(PIA)作为探针,建立了一种基于柱前荧光衍生技术快速测定23种脂肪酸的方法,在65min内实现了23种脂肪酸的基线分离。该方法的检测限可以达到0.16-0.51ng/mL。该方法成功用于假北紫堇中游离脂肪酸含量测定。结果表明:假北紫堇的不同组织中均含有大量的脂肪酸,含有的饱和脂肪酸种类集中在C14-C19,含有的不饱和脂肪酸有C18∶1,C18∶2,C18∶3和C20∶4。花中总脂肪酸含量最高,高达4113.07±1.21μg/g,根和叶中脂肪酸含量相对较少。 4、采用高效液相色谱法对假北紫堇粗提物中的5种生物碱(小檗碱,比枯枯灵,紫堇灵,原阿片碱和乙酰紫堇碱)进行了含量测定及体外抑菌活性研究。实验结果显示,紫堇灵在假北紫堇中含量最高,达到2.17mg/kg,其次是比枯枯灵和乙酰紫堇。选取5种菌株,对粗提物的体外抑菌活性进行了初步探索,测定了抑菌圈和最小抑菌浓度两个指标。假北紫堇粗提物对所测菌株均表现出抑制作用,其中以对屎肠球菌、神户肠杆菌和蕈状芽孢杆菌的抑制作用最为明显,最低抑菌浓度分别为6.25mg/mL,12.5mg/mL和12.5mg/mL。