慢病毒载体介导的RNAi技术抑制RhoC基因在卵巢癌细胞中表达的体外实验研究

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目的:构建慢病毒介导的能够稳定沉默卵巢癌SKOV3细胞中RhoC基因的干扰载体,观察其对卵巢癌SKOV3细胞内RhoC基因表达的抑制作用。材料和方法:将产生RhoC miRNA分子的携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组慢病毒感染卵巢癌SKOV3细胞后,用嘌呤霉素筛选稳定表达的细胞系。应用荧光定量PCR法检测SKOV3细胞中的RhoC mRNA。结果:成功构建了特异性干扰载体,将其转染SKOV3细胞后,干扰组细胞中RhoC mRNA的表达率较空白对照组显著降低。结论:构建的重组慢病毒RhoC shRNA干扰载体能有效抑制SKOV3细胞中RhoC mRNA的表达,具有较高的沉默效率。
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