草鱼是我国淡水养殖最主要的大宗养殖鱼类之一,在四大家鱼中养殖中占有极其重要的地位,但因其常年遭受呼肠孤病毒侵染致死率居高不下,造成了水产养殖业极大的经济损失,严重制约了草鱼养殖业健康高效可持续发展。在草鱼严峻养殖背景下,本课题组数年来对草鱼免疫进行了多方面的研究,在针对草鱼母源性免疫研究中发现,母源免疫处理可以增强草鱼子代GCRV抗性,且对母源免疫草鱼及普通草鱼卵细胞蛋白组进行比对分析发现,Ferritin蛋白经母源免疫处理后水平显著上调。基于此发现,本研究获取了草鱼Ferritin基因,探究其在草鱼免疫应答中的表达特性,并以母源免疫处理子代及普通草鱼子代作为原材料,对其在Ferritin跨代传递和表观遗传进行分析,旨在了解草鱼Ferritin功能及在母源免疫处理下对Ferritin基因表达作用机制,为抗逆草鱼遗传选育提供参考。本文主要研究内容如下:1.草鱼Ferritin cDNA全长克隆及生物信息学分析运用RACE技术扩增出草鱼Ferritin全长cDNA 1053 bp,序列登录号为MK934175.1,其ORF编码区共编码176个氨基酸。生物信息学分析显示,草鱼Ferritin基因预测仅存在一个铁蛋白结构域,无跨膜螺旋且无信号肽,其多序列比对及系统进化树结果表明,草鱼Ferritin基因在遗传学上具有高度保守性。2.草鱼Ferritin组织表达特性采用qRT-PCR技术对草鱼正常组织、GCRV攻毒后组织及早期胚胎中Ferritin表达特性进行检测,结果显示草鱼Ferritin基因在测定的10个组织中均有所表达,在脾脏、肾脏中表达量较高;感染GCRV后,在草鱼脾脏和肾脏中Ferritin表达水平都呈现先上升后下降再上升的趋势,表明Ferritin参与草鱼免疫应答。3.草鱼Ferritin基因表达水平调控机制分析采用重亚硫酸盐测序法和MALDI-TOF质谱检测母源免疫草鱼子代及普通草鱼子代Ferritin基因甲基化修饰水平,分析甲基化水平与mRNA表达的关联。结果显示GCRV弱毒疫苗处理后草鱼亲鱼所产生的后代在Ferritin基因启动子的甲基化水平显著低于普通草鱼所产生的子代,其Ferritin mRNA表达水平显著高于普通草鱼子代。跨代传递过程中,Ferritin表达水平在卵和受精卵中表达水平较高,在二细胞至水花期表达量低于普通草鱼子代对照组,这证实Ferritin在母源免疫中跨代传递。