IDO抑制剂对慢性脑低灌注大鼠海马CA1区细胞凋亡的影响

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目的:观察慢性脑低灌注模型2VO(2-vessel occlusion)大鼠使用犬尿氨酸通路(Kynurenine pathway,KP)限速酶吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine2,3-dioxygenase,IDO)抑制剂1-甲基色氨酸(1-MT)后海马CA1区细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化,以及对认知功能水平的改善作用。方法:实验动物随机分入模型、1-MT、假手术三组中,每组10只。模型组及1-MT组行双侧颈总动脉结扎术(Bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)制备2VO模型,假手术组在模型制备术中不结扎颈总动脉。1-MT组予1-MT混悬液灌胃,其余两组予生理盐水灌胃,共14天。Morris水迷宫检测认知功能,TUNEL法观察细胞凋亡,免疫组化法测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达。结果:(1)水迷宫试验:1-MT组第4、5天的逃避潜伏期分别为(17.93±3.24)、(13、11±1.85),低于模型组的(42.31±6.03)、(41.12±4.56)(P<0.05),高于假手术组的(13.86±2.84)、(10.59±2.09)(P>0.05);1-MT组穿越平台位置次数(4.70±0.60),高于模型组的(2.50±0.45)(P<0.05),低于假手术组的(4.90±0.66)(P>0.05);1-MT组目标象限停留时间(26.87±1.82),高于模型组的(21.56±1.74)(P<0.05),低于假手术组的(28.01±1.44)(P>0.05)。(2)Bax蛋白表达分别为假手术组(6.25±1.04)、模型组(56.43±2.62)、1-MT组(30.16±2.17),各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);Bcl-2蛋白表达分别为假手术组(9.97±2.66)、模型组(48.67±5.99)、1-MT组(32.67±4.71),模型组及1-MT组比假手术组表达均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);凋亡细胞分别为假手术组(1.79±0.41)、模型组(14.13±1.44)、1-MT组(7.80±1.38),各组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)2VO大鼠海马CA1区出现细胞凋亡、凋亡蛋白表达增加,提示慢性脑低灌注大鼠病理性改变中存在细胞凋亡,可能与伴随发生的认知功能减低相关;(2)使用1-MT可以减轻2VO大鼠认知功能损害、减少海马CA1区神经细胞的凋亡及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达,但细胞凋亡的改善程度似乎不足以解释认知功能的改善程度,提示1-MT可能是通过细胞凋亡、炎性反应等机制共同作用来影响认知功能。
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