本研究以高、低产蛋雷州黑鸭为研究对象,应用转录组测序技术对HG和LG雷州黑鸭卵巢组织进行小RNA测序分析,筛选差异表达miRNA,并通过GO和KEGG预测与产蛋性状相关的差异miRNA靶基因。使用q PCR、Edu、CCK8和流式细胞术方法,研究miR-34-x对卵泡颗粒细胞增殖和凋亡的影响;双荧光素酶报告基因检测和q PCR,初步研究miR-34-x与靶基因之间的靶向关系,以期筛选出对产蛋性状具有调控作用的miRNA及其靶基因,为未来雷州黑鸭的产蛋性状分子育种奠定生物学基础。（1）本研究将采集到的HG和LG雷州黑鸭卵巢组织进行小RNA测序。结果显示,所有小RNA序列长度数量最多为22 nt。HG和LG两组间上调和下调差异表达miRNA共29个。miRNA靶基因KEGG通路结果表明,与繁殖相关信号通路包括催产素、Gn RH、卵巢类固醇生成和PI3K/Akt信号通路等;GO分析表明,靶基因分别在生物学过程、细胞组分、分子功能中显著富集。随机选取12个差异表达miRNA,内参基因选用U6,通过q PCR验证小RNA测序结果的准确性。结果得出q PCR结果与测序所得结果的趋势一致。以上研究结果丰富了鸭miRNA的数据库资源,为之后miRNA调控卵巢发育研究奠定基础。（2）对雷州黑鸭原代卵泡颗粒细胞进行分离培养,采用机械分离法和酶消化法两者结合的分离方法,使用0.1%Ⅱ型胶原酶消化细胞。通过采用半定量PCR比较FSHR在卵巢和不同等级前卵泡颗粒细胞的表达情况,以及细胞间接免疫荧光染色方法对分离的颗粒细胞进行鉴定,证明本试验分离培养的细胞是卵泡颗粒细胞。（3）为探究miR-34-x对雷州黑鸭卵泡颗粒细胞增殖和凋亡的影响。通过在原代颗粒细胞中转染miR-34-x mimics和inhibitor,利用q PCR、CCK8、Ed U、流式细胞术检测细胞增殖和凋亡。CCK8结果显示,mimics组低于mimics NC组,inhibitor组高于inhibitor NC组;Ed U检测结果显示转染mimics组Ed U阳性细胞所占比低于NC组,转染inhibitor组所占比高于NC组。q PCR检测增殖标志基因,结果显示转染mimics后,CCND1、CDK2表达量极显著降低（P<0.01）;而转染inhibitor后,CCND1极显著上升（P<0.01）,CDK2显著上升（P<0.05）。流式细胞术检测发现,转染mimics后,细胞凋亡率增高,转染inhibitor后凋亡率降低;q PCR检测细胞凋亡标志基因,结果显示转染mimics后,Caspase3、TP63与NC组相比表达量显著升高（P<0.05）;而转染inhibitor后,TP63极显著降低（P<0.01）;综合以上结果得出,miR-34-x可抑制雷州黑鸭卵泡颗粒细胞增殖,促进其凋亡。（4）为研究和鉴定miR-34-x的候选靶基因,通过生物信息学方法得出PIK3CG为候选靶基因。使用双荧光素酶和q PCR进行验证。结果发现PIK3CG野生型（WT）和miR-34-x mimics共转染组荧光素酶活性显著低于对照组（P<0.05）,说明miR-34-x与PIK3CG存在靶向关系;q PCR得出miR-34-x能够靶向抑制PIK3CG的表达。基于以上结果,可以得出PIK3CG是miR-34-x的候选靶基因。综上所述,小RNA测序结果发现在高、低产雷州黑鸭中,共有差异表达miRNA29个;miR-34-x可以促进颗粒细胞凋亡,PIK3CG是miR-34-x的靶基因。