健康香蕉内生菌群落形成特征及其应用

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香蕉枯萎病是由病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型(Fusarium oxysporum f.sp.cubense)引起的土传病害,目前已严重威胁到香蕉产业的可持续发展。近年来以施用微生物有机肥为代表的生物防治成为了防治香蕉枯萎病的重要手段。香蕉内生菌是一类长期生活在香蕉植株内部的微生物,在香蕉植株生长过程中与香蕉植株建立了紧密和谐的共生关系,香蕉植株为其提供营养物质促进内生菌繁殖,而内生菌通过分泌植物激素类活性物质调节植株生长,提高香蕉植株抗逆性。本文利用高通量测序手段比较了健康与发病香蕉植株内生菌群落结构差异,明确健康香蕉特有的内生菌群;通过设置不同微生物组成的培育香蕉内生菌的实验,了解不同的微生物组成的对香蕉内生菌群落结构的影响;通过筛菌获得3株内生菌,利用水培试验和平板对峙实验验证了其促生效果和拮抗效果。主要研究结果如下:1.通过高通量测序分析了健康和发病香蕉植株根部、茎部、叶部内生菌群落结构差异,明确了健康香蕉菌群特有属种类。研究结果表明,植株对菌群吸收具有选择性,且根部、茎部、叶部对微生物具有不同的选择能力。香蕉内生菌群落结构、多样性、丰富度与香蕉健康水平密切相关,病原菌入侵降低了香蕉植株对外源菌的选择能力。代尔夫特菌属(Delftia)、芽孢杆菌属(Bacillus)、海洋放线菌属(Salinispora)、不粘柄菌属(Asticcacaulis)、动胶菌属(Zoogloea),为健康香蕉植株各部位特有的内生菌群,是潜在的能够用于防控香蕉枯萎病的理想菌株。2.香蕉植株在不同的生长环境中,对外源菌具有不同的选择吸收能力;香蕉植株根部内生菌相对丰度受培养时间影响较大,茎部和叶部内生菌相对丰度较为稳定。链霉菌属(Streptomyces)、土壤杆菌属(Agrobacterium)、金黄杆菌属(Chryseobacterium)、不粘柄菌属(Asticcacaulis)、固氮螺菌属(Azospirillum)、Phenylobacterium、假单胞菌属(Pseudomonas)、Pedobacter、苍白杆菌属(Ochrobactrum)、弯曲杆菌属(Flectobacillus)、动胶菌属(Zoogloea)、鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas)、Dechloromonas、副杆菌属(Parabacteroides)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)存在于香蕉植株根部、茎部、叶部。3.通过对已获得的第三周香蕉植株样品进行筛菌,获得3株拥有不同细菌形态的菌株,通过不同接菌方式接种香蕉幼苗进行水培实验,发现根部营养液接菌和茎叶喷雾接菌能够显著提高香蕉植株的株高、茎粗、鲜重和干重,其中根部营养液接菌促生效果最为显著。经过进一步鉴定,这三株菌株分别为巨大茅孢杆菌(Bacillusmegaterium BEI)、铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa BE2)、解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus BE3)。平板对峙实验结果表明,巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium BE1)、解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus BE3)对香蕉病原菌尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4 FOC4)具有显著的拮抗效果。综上所述,香蕉植株不同部位对外源菌具有不同的选择吸收能力。香蕉植株根部内生菌相对丰度受香蕉种植时间影响较大,茎部和叶部内生菌相对丰度较稳定。根部接菌与茎叶喷雾接菌显著促进香蕉生长,其中根部接菌促生效果最为显著,接种巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium BE1)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa BE2)、解淀粉类芽孢杆菌(Paenibacillus amylolyticus BE3)促生效果最为显著。
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