本论文研究了雌激素和催乳素单独或组合添加对奶牛乳腺上皮细胞（BMECs）酪蛋白合成的影响,并从m TOR和JAK2-STAT5信号通路关键基因表达的角度初步阐释了其机理,旨在探明促进BMECs酪蛋白合成适宜的雌激素和催乳素水平,为调控奶牛乳成分合成提供理论依据。本论文包括三部分试验。试验一研究添加不同水平的雌激素（0、50、100、200、400 ng/m L）对BMECs增殖、酪蛋白基因以及m TOR和JAK-STAT5通路基因表达的影响。结果表明:添加100和200 ng/m L的雌激素显著提高了BMECs的增殖率（P<0.05）。添加50 ng/m L雌激素显著上调了BMECs的κ酪蛋白基因（CSN3）、苏氨酸激酶（AKT）、真核翻译起始启动因子4E（e IF4E）、葡萄糖转运载体8（GLUT8）和葡萄糖转运载体12（GLUT12）的基因表达（P<0.05）;添加100 ng/m L和200 ng/m L雌激素显著上调了BMECs的αs1-酪蛋白（CSN1S1）、CSN3、AMP活化蛋白（AMPK）、AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）、核糖体蛋白S6激酶（S6K1）、e IF4E、酪氨酸激酶2（JAK2）、信号转导及转录因子（STAT5）、葡萄糖转运载体1（GLUT1）、GLUT8、GLUT12、雌激素α受体（ERα）、雌激素β受体（ERβ）和催乳素受体（PRLR）基因表达（P<0.05）;当雌激素浓度达到400 ng/m L时下调了BMECs中AMPK、磷脂酰肌醇-3-羟激酶（PI3K）、S6K1和JAK2的基因表达。综合细胞增殖和酪蛋白基因表达的结果,100 ng/m L的雌激素对BMECs酪蛋白合成的促进效果最佳。试验二研究添加不同水平的催乳素（0、100、200、400、800 ng/m L）对BMECs增殖、酪蛋白表达以及m TOR和JAK-STAT5通路基因表达的影响。结果表明:与对照组相比,添加100 ng/m L和200 ng/m L催乳素显著增加了BMECs的增殖率（P<0.05）,而400和800 ng/m L催乳素对BMECs的增殖率无显著影响（P>0.05）。100ng/m L和200 ng/m L催乳素显著上调BMECs中CSN1S1、CSN2、CSN3、AMPK、AKT、m TOR、S6K1、JAK2和GLUT1的基因表达（P<0.05）;200 ng/m L催乳素还显著上调了e IF4E、ERα、PRLR和GLUT8的基因表达（P<0.05）;400 ng/m L催乳素显著上调BMECs中CSN2、AMPK、AKT、S6K1、ERβ、PRLR、GLUT1、GLUT8和GLUT12的基因表达（P<0.05）;当催乳素浓度达到800 ng/m L时,显著下调了BMECs中CSN3和e IF4E的基因表达（P<0.05）。添加100 ng/m L和200 ng/m L催乳素显著增加了BMECs的α酪蛋白和β酪蛋白表达量（P<0.05）,且以200 ng/m L组效果最佳。试验三以前两个试验筛选出的促进BMECs酪蛋白合成的最佳雌激素和催乳素浓度为基础,开展组合添加试验。雌激素和催乳素的添加总量为300 ng/m L,根据二者的添加比例分为试验Ⅰ组（对照组,不添加雌激素和催乳素）、试验Ⅱ组（雌激素:催乳素=5:1）、试验Ⅲ组（雌激素:催乳素=2:1）和试验Ⅳ组（雌激素:催乳素=1:2）,研究组合添加雌激素和催乳素对BMECs酪蛋白合成的影响。结果表明:与对照组相比,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均显著增加了BMECs的增殖率,提高了BMECs中CSN1S1、CSN3、AMPK、PI3K、AKT、m TOR、e IF4E、JAK2、STAT5、ERβ、PRLR、GLUT1、GLUT8和GLUT12的基因表达（P<0.05）;试验Ⅲ组和试验Ⅳ组显著提高了BMECs中CSN2的基因表达（P<0.05）。与对照组相比,试验Ⅱ组和Ⅳ组显著增加了BMECs的α酪蛋白和β酪蛋白表达量（P<0.05）,其中α酪蛋白的表达量分别提高了22.7%和38.6%,β酪蛋白的表达量分别提高了62.9%和102.9%。试验Ⅲ组β酪蛋白的表达量显著高于对照组（P<0.05）,而α酪蛋白表达量与对照组无显著差异。综合细胞增殖和酪蛋白表达的结果,组合添加100 ng/m L雌激素和200 ng/m L催乳素的试验Ⅳ组对BMECs酪蛋白合成的促进效果最佳。