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目的:探究C19orf12对非小细胞肺癌A549细胞系肿瘤生物学功能及代谢重编程的影响。方法:本文主要分三部分进行研究:第一部分,构建敲低C19orf12的A549细胞系A549 scramble、shC19orf12-1和shC19orf12-2,利用通过Western blot和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分别在蛋白水平和mRNA水平验证C19orf12的敲低效率。Transwell迁移实验、划痕实验验证C19orf12对于A549细胞体外迁移功能的影响;将A549 scramble和A549 shC19orf12-1两种细胞注射裸鼠尾静脉,观察C19orf12对于A549细胞体内肺部转移瘤形成的影响。通过MTS、克隆形成实验检测A549 scramble、shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞的增殖和克隆形成,验证C19orf12对于A549细胞的体外增殖能力的影响;通过小鼠皮下成瘤实验验证C19orf12对于A549细胞的体内成瘤能力的影响;通过FITC Annxin V染色检测C19orf12对于A549细胞凋亡的影响。第二部分,通过RNA-seq实验检测C19orf12在A549细胞参与的生物学功能,RT-qPCR检测A549 scramble、shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞中氧化磷酸化基因的mRNA表达情况。第三部分,通过seahorse细胞能量代谢仪检测A549 scramble、shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞的胞外酸化率(ECAR)和耗氧率(OCR)。通过检测培基中的葡萄糖、乳酸和谷氨酰胺验证C19orf12对A549相关营养物质的利用的影响。结果:(1)成功构建敲低C19orf12的A549细胞系,A549 shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞的迁移的细胞数和划痕迁移速度明显低于对照A549 scramble细胞。与对照A549 scramble细胞相比,敲低组A549 shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞的小鼠肺部转移瘤形成的数量和肺组织重量明显降低。与对照A549 scramble细胞相比,敲低组A549 shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞的增殖、克隆形成、小鼠皮下成瘤的体积和重量以及凋亡率都无明显差异。(2)GSEA数据库分析表明,与对照A549 scramble细胞相比,敲低组A549shC19orf12-1细胞的三羧酸循环和氧化磷酸化基因表达增高;RT-qPCR结果表明与对照A549 scramble细胞相比敲低组A549 shC19orf12-1和shC19orf12-2细胞相关氧化磷酸化基因的mRNA表达明显增高。(3)与对照A549 scramble细胞相比,敲低组A549 shC19orf12-1和shC19orf12-2的细胞外酸化率明显减低,而耗氧率增高,细胞葡萄糖消耗、乳酸的生成和谷氨酰胺的消耗明显减低。结论:1、C19orf12促进了A549细胞在体外和体内的迁移能力。2、C19orf12不影响A549细胞增殖和凋亡能力。3、C19orf12抑制了A549细胞氧化磷酸化而促进了其糖酵解功能,促进了A549细胞对于葡萄糖和谷氨酰胺的利用。4、C19orf12可能是肿瘤代谢治疗的一个潜在靶点。