rAAV介导CTLA4-FasL融合基因对类风湿性关节炎的基因治疗研究

被引量 : 0次 | 上传用户:wo19881026
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis)是一种以关节滑膜炎为特征的慢性自身免疫性疾病,主要侵犯关节腔内的滑膜组织,引起滑膜的过度增殖,甚至侵犯软骨造成骨破坏,致畸率很高,严重影响患者的生存质量和预期寿命,一直以来都是世界范围内研究热点。类风湿性关节炎的病理特征为关节腔内滑膜细胞的异常增殖及炎症细胞的浸润;其发病机制不明确,致病环节及致病因素十分复杂,给研究工作带来很多困难。目前研究表明,治疗方案可分为传统中药、西药、手术及生物治疗。基因治疗可采取局部基因转移方法,在病变关节局部达到理想的蛋白质浓度,降低了正常组织和器官与外源药物接触所造成的危险。成纤维样滑膜细胞(FLSs)会显著促进类风湿性关节炎的发病。通过引进凋亡诱导物FasL抑制关节内成纤维样滑膜细胞的增殖,为RA的治疗提供了一种有效的方法。而T淋巴细胞是一种对类风湿关节炎的发病机理非常重要的炎症细胞,所以针对T淋巴细胞生物治疗也可以提供一个治疗类风湿性关节炎较有效率的方法。细胞毒T细胞相关抗原4(CTLA4)可以抑制自身反应性T细胞的活化,并使其进入无能;而FasL则可以上调Fas抗原调节的凋亡信号,从而诱导滑膜细胞凋亡,抑制滑膜炎症。CTLA4-FasL融合基因整合了CTLA4和FasL的胞外区基因,一方面通过CTLA4功能域抑制自身反应性T细胞激活;另一方面,对逃脱抑制的活化细胞,通过FasL功能域诱导其凋亡从而实现多途径抑制和清除自身反应性T细胞,成为具有治疗RA治疗潜能分子。在本研究中,我们探讨CTLA4-FasL蛋白对RA动物模型的治疗效果,及其在细胞模型中抑制炎性成纤维样滑膜细胞增殖和炎症的作用。我们首先构建了CTLA4-FasL融合基因,并通过表达载体表达后进行纯化并验证其生物活性。然后构建了重组病毒载体pAAV.CTLA4-FasL,对其进行病毒包装并初纯化。利用热灭活结核杆菌H37Ra菌株、矿物油免疫Lewis大鼠建立了佐剂诱导性关节炎(AIA)动物模型,并证明其具有关节炎的临床症状和典型的组织学特征。随后通过关节腔注射重组病毒rAAV.CTLA4-FasL的方法,以增强的绿色荧光蛋白(rAAV.EGFP)作为对照,将CTLA4-FasL由重组腺相关病毒载体递送到AIA大鼠关节中,通过观察并收集临床表现和病理组织学等方面数据,与对照组相比,实验组表现出明显的治疗效果,同时我们还发现通过治疗也能显著降低AIA关节中关键性炎性细胞因子的水平,而从各个方面证明重组病毒rAAV.CTLA4-FasL能够对AIA大鼠的关节炎症起到显著的缓解和治疗作用。并通过实验证明CTLA4-FasL蛋白与FLSs共孵育,可以明显诱导FLSs的凋亡,进一步从细胞模型上证明了CTLA4-FasL蛋白对RA的治疗作用。有以上结果我们得出结论:由AAV载体介导的CTLA4-FasL基因递送明显抑制RA的动物模型的关节炎症,表明通过局部关节递送CTLA4-FasL治疗RA具有潜在的应用前景。
其他文献
目前中国的水彩画发展日新月异,水彩画的概念由于受到现在中国文化和观念的转变也得到了更广阔的拓展,越来越有包容性,作画风格呈多元化。每年各个省都有大型的水彩展览,水彩画在
赤峰市翁牛特旗农田防护林的建设对当地的农业生态条件具有极大的改善作用,同时有效的保证人们的生活正常进行,而且也产生了多种效益。对该地区农田防护林体系的综合效益进行
十九世纪,英国邮政系统作为一个重要政府机构,又是一个典型的公共企业,既要服务公众,又同时承担盈利职能,有其特殊性。这一特殊身份不仅有双重责任,也产生了双重压力,导致“
人血清白蛋白(Human SerumAlbumin, HSA)是一种在医学上应用广泛,需求量大的蛋白质类药物,可维持血液的正常渗透压和促进亲水分子输送,主要用于治疗大量失血、烧伤、休克、水肿及
自然政治观和有机体城邦观是亚里士多德论述参与式公民身份思想的逻辑前提。公民德性与城邦德性构成了亚里士多德参与式公民身份思想的政治伦理维度。公民德性是参与式公民身
风力发电机组在超风速、故障排除及日常维护等工况需要停机制动,而且风电制动器在高空作业更换维修不便,这要求风电制动器具备优异的制动性能及高可靠性。近两年,我国风电行业经
新形势下,会展营销可以在较短的时间内增加企业的效益,提高企业品牌的知名度,构建一种最新型营销形式,向顾客或者是同行业展示自己的最新产品及成果。如果组展商不能提供对应
变电所的接地问题,是电力系统设计、建设与运行中的关键问题之一。随着电力系统容量的不断增大,短路入地电流也随之增大,这对电力系统的性能要求也就越严格。由于冻土地区特
随着电动汽车产业的发展以及全国各地充电站的不断兴建,动力电池充电设备得到了广泛的应用。因此减少网侧谐波含量,提高充电设备的功率因数已经是当今充电设备的必然要求。三
随着国际原油价格持续走高,石油储存量的持续减少,我国的能源结构需要尽快调整,根据我国“富煤,少油,缺气”的特点,煤制油成为快速解决问题的渠道,但大量使用煤炭对环境影响