美洲大蠊肠道抗菌活性菌株的筛选及其共生链霉菌Streptomyces sp.PAS8的活性成分研究

来源 :大理大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rylove006
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本课题以野外采集的美洲大蠊为研究材料,对其肠道共生微生物进行分离纯化,检测分离菌株的抗菌活性;并选择一株具有明显抗菌活性的菌株,对其次生代谢产物的抗菌活性部位进行分离、纯化,并对分离得到的单体化合物进行最小抑菌浓度的检测,以期发现具有抗菌活性的天然化合物。方法:1.应用稀释涂布法和平板划线法对美洲大蠊肠道共生菌进行分离纯化。2.采用交叉条纹法、对峙培养法和牛津杯法分别对共生细菌、真菌和放线菌进行抗菌活性检测;并利用分子生物学技术对抗菌活性明显的菌株进行鉴定。3.选择具有明显抗菌活性的链霉菌Streptomyces sp.PAS8进行大规模的固体发酵;通过牛津杯法进一步确定菌株次生代谢产物的抗菌活性部位;利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析技术对活性提取部位进行分离和纯化;结合核磁共振波谱和HRESI-MS对化合物结构进行解析,并采用二倍稀释法测定化合物的最低抑菌浓度。结果:1.从10头野外美洲大蠊肠道内共分离获得185株共生菌,其中细菌68株、真菌76株和放线菌41株。2.肠道共生菌次生代谢产物的抗菌活性结果显示,共有28株(41.2%)细菌具有较弱的抗菌活性;23株(30.3%)真菌和34株(82.9%)放线菌具有不同程度的抑菌活性。对抗菌活性明显和广谱抗菌活性的放线菌采用16S r RNA测序进行分类鉴定,结果显示这些放线菌均归属为链霉菌属;其中一株抗菌活性明显的链霉菌PAS8,其16S r RNA序列与紫红链霉菌属(KJ676477)的相似度为99.86%。3.将链霉菌Streptomyces sp.PAS8的次生代谢粗提物分别用水和乙酸乙酯进行萃取,牛津杯法结果显示链霉菌PAS8的乙酸乙酯部位具有抗菌活性。通过正相硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析技术,对链霉菌PAS8的抗菌活性部位进行分离纯化;结果共分离鉴定了3个化合物,分别是aloesaponarin II(1)、5-(2′-oxo-4′R-hydroxy-hexa noic acid)-2-methyl-chromone(2)和13-methyltetradecanoic acid(3),其中化合物1对粪肠球菌的最低抑菌浓度为128μg/m L。结论:从野外美洲大蠊肠道内共分离得到了185株菌株,以6种病原细菌为指示菌株,筛选出具有抗菌活性的美洲大蠊肠道共生菌株共85株(45.9%),其中包含28株细菌、23株真菌和34株放线菌,建立了美洲大蠊肠道共生微生物的抗菌活性菌种资源库。选择抗菌谱较广且对MRSA具有明显抗菌活性的链霉菌PAS8进行大规模发酵后,从其次生代谢产物分离鉴定了3个化合物,其中化合物aloesaponarin II对粪肠球菌和铜绿假单胞菌具有一定的抑制作用,结果表明美洲大蠊肠道共生微生物具有挖掘抗菌活性化合物的潜力。
其他文献
澳大利亚高中毕业考试在澳大利亚地位相当于在我国的“高考”,该考试实施自由选科制度,除了英语为必修科目之外,学生们可以自由地选择科目,这些科目的高考成绩是毕业生申请大学的重要依据。世界上许多国家都实施自由选科的制度,选科制度极大地提高了学生的自由选择的权利,其灵活性和多样性的特点备受好评。澳大利亚高考的选科制度已经形成了成熟体系,社会各界多方位对学生的选科进行指引和支持。研究澳大利亚高考科目自选的制
学位
文章根据《中国高考评价体系》所提出的“四层”“四翼”考查要求,参照2021年广东卷的研究成果详细分析了2022年广东卷高考物理试题。基于比较,发现试卷突出了物理情境的考评功能,基于物理情境试卷具有以极具新颖性的卷面素材凸显必备知识的灵活迁移,以充满历史感的时代题材渗透核心价值的中国特色,以富有层次性的问题选项考查关键能力的不同维度,以一众多样化物理模型体现能力立意的策略化复习特点等,最后结合试题特
期刊
日常家事代理权是婚姻的当然效力,是婚姻的本质属性,意味着夫妻一方享有在婚姻关系存续期间代理另一方处理日常家事的权利,但法律后果由双方共同承担。《民法典》出台以前,我国尚未在法律层面确立与日常家事代理权相关的规定,仅存在于司法解释当中,且其也不能完全等同于日常家事代理权。而后《民法典》出台,首次在立法层面确立了日常家事代理权,这是对该制度存在的合理性与特殊性的肯定。但其所建构的制度仍是原则性的,较为
学位
<正>动脉粥样硬化性颈动脉和椎动脉疾病是一类严重威胁人类生命健康的退行性病变,此类病变主要通过影响人类头向供血,进而导致缺血性卒中的发生。研究提示,缺血性卒中大约有30%是由于颅外段颈动脉、椎动脉病变导致[1]。随着药物的发展、治疗理念变更与手术技术的进步,此类疾病的预后较以往有了极大的改善,但临床实践中仍然存在诸多争议。2022年5月20日,欧洲血管外科学会(ESVS)在European Jou
期刊
随着时代的发展,我国的国民经济水平相比以前有了很大程度上的提升,对衣食住行等生活方面的要求也越来越高,在出行方面,最近这些年发展的特别快,从一开始的高速公路,到现在的铁路火车,高铁,还有航天飞机,这些都使人们的出行越来越方便快捷。近些年来,我国对于航空航天制造业越来越重视,投入越来越多的资金进行航空航天事业的发展和研究。本文章下面就从航空航天业的制造技术和设备的现状和发展趋势进行一系列的介绍。
会议
合唱艺术在中国发展的百年中,取得了辉煌的成就,特别是少数民族合唱作品的创作取得了迅猛的发展,许多作曲家将现代音乐元素与民族元素进行碰撞,创作了大量优秀的少数民族合唱作品,刘晓耕老师就是其中的代表性人物。民族无伴奏合唱作品《新编蝴蝶歌》是2019年广西艺术合唱团委约刘晓耕先生创作的作品,主要以广西富川平地瑶蝴蝶歌为依据,历时一年多编创而成。该作品在简单的二声部蝴蝶歌素材的基础上,加入了大量的现代音高
学位
党的十八大以来,习近平高度重视人民群众的根本利益,尤其重视贫困问题,将脱贫攻坚放在治国理政的新高度上,并就扶贫相关问题发表了一系列论述和观点,形成了十八大以来习近平扶贫思想的重要内容。本文以马克思主义理论作为研究基础,遵循辩证唯物主义和历史唯物主义基本规律,通过各种方法研究中国共产党扶贫思想的产生和发展,为研究十八大以来习近平扶贫思想的理论与实践奠定基础。本文研究的主要内容包括三部分:第一部分,阐
学位
源头溪流生态安全对整个河网生态系统具有重要影响。随着人为干扰和自然干扰的变化,流域内植被覆盖度、植物物种组成、多样性、河岸植物繁殖与传播方式都发生不同程度的改变。本文以福建省九龙江源头溪流地村溪为研究对象,通过野外调查与“3S”技术结合,分析地理地形、河流水文、土壤理化性质与水电开发、城镇建设、农业活动、河岸养殖等影响下河岸植被的演变与响应机制,以期了解源头溪流所面临的生态问题。探究源头溪流中小水
学位
目的:1.调查分析大理地区面部皮肤光老化人群的临床特征、护肤习惯及对光老化相关知识认知度。2.观察美洲大蠊提取物联合微针治疗面部皮肤光老化的有效性及安全性。方法:1.以2021年2月至2022年2月在大理大学第一附属医院皮肤科及医学美容科就诊人群中,诊断符合面部皮肤光老化的患者为研究对象,填写自拟调查问卷共120例,并对调查结果进行描述性分析。2.选取60例符合纳入标准的面部光老化患者进行临床随机
学位
无论是理论界还是实务界,关于抵押权、建设工程优先受偿权和买受人物权期待权之间的顺位关系尚未达成一致意见。研究同一商品房多种权利并存顺位优先问题,既有利于减少此类案件在实践中面临的同案不同判窘境,也有助于实现房地产行业的良性发展。样本案件源于抵押权人根据法院对于金融借款纠纷的生效判决申请强制执行房地产开发商名下办理抵押商品房,但是该商品房已被房地产开发商以签订买卖合同的方式转让给买受人和以以房抵工程
学位